我国学者成功构建感染性口蹄疫病毒粒子

        中国农业科学院兰州兽医研究所刘光清、刘在新、谢庆阁等，最近完成了口蹄疫病毒ＯＨ／ＣＨＡ／９９株全长基因组感染性克隆的构建，所得拯救病毒与亲本毒株的致病性基本一致。从而为我国研究口蹄疫病毒基因组的结构、功能及其致病机理等，提供了研究工具和技术平台。  

        据刘在新研究员介绍，口蹄疫病毒（ＦＭＤＶ）是一种小ＲＮＡ病毒，主要引起偶蹄动物的口蹄疫，是一种危害严重的烈性传染病病原。由于口蹄疫病毒的基因组为单股正链ＲＮＡ，在复制过程中不形成ＤＮＡ中间体，基因工程技术大都在ＤＮＡ分子水平上进行操作，要在基因水平上研究口蹄疫病毒的分子致病机制难度很大。而反向遗传学技术的兴起，解决了这一难题。  

        反向遗传学技术即“全长基因组感染性克隆构建”技术。刘在新说，经典遗传学通过分析生物性状、表型和遗传物质研究生命的发生与发展规律；反向遗传学则在获得生物体基因组全部序列的基础上，再按组成顺序构建含生物体必需的基因元件的基因组，让其装配出具有生命活性的个体，最后对靶基因进行定点突变、基因插入或缺失、基因置换等必要的改造，构建为修饰基因组，研究生物体基因组的功能，以及这些修饰可能对生物体的表型、性状产生的影响等。  

      他表示，反向遗传学技术在ＲＮＡ病毒的研究上更具优势。由于ＲＮＡ的不稳定性，对其进行直接操作很不容易，先将ＲＮＡ病毒的基因组转换成ｃＤＮＡ，再对稳定的ｃＤＮＡ实施多种方式的基因操作，就能达到对病毒基因组表达调控机制、病毒致病的分子机理等进行研究，甚至得到减毒毒株用以开发新型疫苗的目的。  

      刘在新是“９７３”计划“重大畜禽疫病病原大分子结构与功能研究”项目分课题“病毒基因组及其编码蛋白一级结构研究”的负责人。在项目首席科学家谢庆阁研究员的指导下，课题组完成了３株口蹄疫病毒的全基因组序列测定和分析。为进一步深入研究口蹄疫病毒的基因功能和相关的生物学特性，研究人员首先构建了猪源口蹄疫病毒ＯＨ／ＣＨＡ／９９株的感染性ｃＤＮＡ，然后利用这一ｃＤＮＡ模板，在体外转录出病毒ＲＮＡ，并对转录物ＲＮＡ的感染性进行鉴定，发现所得拯救病毒的致病性，与其亲本毒株没有明显差异。  

        刘在新表示，这一成果为我国研究口蹄疫病毒基因组的结构、功能，以及致病机理和宿主嗜性等，提供了工具和技术平台；为进一步探索口蹄疫病毒致病的分子机制、病毒的免疫逃避机制以及研制新型口蹄疫疫苗，奠定了良好基础；并且为其它病原的研究提供了技术参考。