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唐雪明团队研发出基于核酸等温扩增的转基因可视化快速检测新技术
【字体: 大 中 小 】 时间:2019年07月19日 来源:生物通
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利用该方法建立的检测技术体系,适合于大规模的转基因成分的现场检测,极大地提高了检测效率,将为我国转基因技术的研究、发展、应用和管理提供重要的技术支撑。
2019年7月17日,上海市农业科学院唐雪明研究员课题组在国际期刊Food Control(食品科学一区)在线发表了题为“Rapid detection of P-35S and T-nos in genetically modified organisms by recombinase polymerase amplification combined with a lateral flow strip”的研究论文。随着全球转基因技术和产品的快速发展,生物育种、国际贸易和市场标识制度亟需田间速测的转基因产品检测技术。目前的方法大多是基于外源蛋白的抗体技术, 然而抗体制备成本高,灵敏度偏低,每个外源蛋白需要制备一个抗体,限制了田间速测技术的普适性和高通量使用。
图:灵敏度检测:P-35S检测限为100拷贝,T-nos检测限为50拷贝
唐雪明团队首次将核酸等温扩增与试纸条结合,实现了可视化快速筛查检测各类转基因产品,这是一项国际相关领域突破性的创新技术,具有很高的应用价值。
该团队对转基因快速检测技术做了大量探索,最终锁定利用先进的RPA“室温扩增”技术快速扩增转基因产品中通用的T-NOS终止子和CaMV35S启动子,并巧妙地与LFD“裸眼显示”技术结合,实现了一次性对国际贸易中流通的9种转基因产品进行快速精准可视化检测。检测技术具有高度专一性,最低达到50拷贝,20分钟内就可以完成大规模样本制备及可视化检测,不依赖任何设备,成本远低于抗体依赖的测试条。
利用该方法建立的检测技术体系,适合于大规模的转基因成分的现场检测,极大地提高了检测效率,将为我国转基因技术的研究、发展、应用和管理提供重要的技术支撑。该技术思路可以为医学肿瘤检测、病毒细菌检测、环境检测和各类生物源污染物的食品安全可视化检测提供借鉴。
该论文第一作者刘华助理研究员,王金斌副研究员为共同第一作者。唐雪明研究员为该论文的通讯作者。该研究得到了农业农村部转基因专项、上海市农委重点攻关项目、上海市领军人才计划、上海农科院卓越团队计划、上海市农委青年人才成长计划等项目支持。
唐雪明研究员团队长期致力于生物安全检测与评价领域的研究,近年在国际相关领域前沿期刊Microbiome、AEM、Science of the Total Environment 、Frontiers of Microbiology、AOAC等期刊上发表了多篇重要文章。
原文标题:
Rapid detection of P-35S and T-nos in genetically modified organisms by recombinase polymerase amplification combined with a lateral flow strip
https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0956713519303640