未编辑的同种异体iNKT细胞在MHC不匹配的犬受体中表现出延长的持久性

　　来自兽医学院和佩雷尔曼医学院的研究人员已经证明，来自健康供体的不变的自然杀伤T细胞可以在mhc不匹配的犬体内持续存在，这为人类临床试验提供了一个可靠的平台。

　　

在之前的研究中，来自健康供体的同种异体不变自然杀伤T细胞(allogene invariant natural killer T cells, allo-iNKTs)已被证明对治疗耐药癌症具有治疗作用，并可提高covid -19相关急性呼吸衰竭患者的生存率。与T细胞不同，同种异体inkt可以从一个人转移到另一个人而不会引起移植物抗宿主病。但同种异体inkt细胞在输注后迅速在体内无法检测到，这引起了人们对其排斥和疾病复发的担忧。它们的功能也因人而异。

来自兽医学院和佩雷尔曼医学院的研究人员假设，如果从具有某些特征的供体中提取同种异体inkt，则可以对抗自身的排斥反应，而无需额外的基因编辑。

他们决定在健康的狗身上验证这一理论。宠物狗患的癌症与人类的癌症有相似之处，这两个物种都接受一些相同的抗癌药物。研究中更常见的动物模型在这种情况下不是相关模型，因为它们具有与人类不同的iNKT生物学。

在这项研究中，“未编辑的同种异体iNKT细胞在mhc不匹配的犬受体中表现出持久的持久性”，发表在《细胞报告医学》上，研究小组发现人类和犬iNKT细胞生物学之间存在显着的相似性。他们还从供体细胞中发现了生物标志物，这些生物标志物表明在受体中存在的时间更长，并发现这些最佳细胞在输注后78天仍可检测到，而之前的试验显示iNKT细胞在两周内就无法检测到。

宾夕法尼亚大学兽医学院免疫生物学研究助理教授Antonia Rotolo解释说，目前的策略通常包括使用来自与受体具有相同主要组织相容性复合体(MHC)蛋白的个体的供体细胞，或者在转移到受体之前消除供体细胞上的MHC蛋白，以降低排斥反应的风险。但这可能会使供体细胞的生产成本高昂且耗时，因此宾夕法尼亚大学的研究人员在mhc不匹配的受体中看到的结果具有重要意义。

罗托洛说:“现在我们有了一个非常棒的、与临床相关的犬类系统，可以在其中测试假设和治疗方案，否则这些假设和治疗方案很难应用于患者。”她说，由于这项研究中的狗体重为30公斤，因此该协议可以很容易地翻译为儿科患者。

她称iNKT细胞在近三个月的时间里保持功能是“了不起的”。罗托洛说，对于人类癌症患者来说，这种延长的寿命意味着降低复发风险和延长治疗效果。

资深作者、兽医学院医学和病理生物学教授尼古拉·梅森说:“我们利用犬细胞获得的数据为对患有癌症和炎症性疾病的犬类患者进行临床前研究奠定了基础，这将为这些细胞在人类临床中的应用提供信息。”

最佳供体

研究人员首先发现了犬类inkt与人类inkt具有相似生物学特性的证据。然后，他们使用单细胞RNA测序来识别来自四个健康犬供体的iNKT分子特征，梅森说，这揭示了来自不同供体的分子特征的可变性。

研究表明，一名供者的iNKT细胞“富含中枢记忆特征，已知可促进iNKT更长的存活时间和抗肿瘤活性”，并且与其他供者相比，其衰竭相关基因明显较少。因此，研究小组从这个供体中提取了临床规模的iNKT细胞，并将其注入两只健康的狗体内。

研究称:“两种接受同种异体inkt治疗的狗在输注同种异体inkt后都表现出循环淋巴细胞的迅速增加和外周血淋巴细胞激活的早期迹象，这强调了同种异体inkt的安全性和大剂量输注的适用性。”未观察到不良事件。

本文还指出，这种供体选择策略很重要，因为测试表明iNKT具有嵌合抗原受体(CAR)工程无法改变的内在特征。

梅森说，除了为人类临床试验提供一个可靠的平台外，这项研究还表明，现在有可能为患有癌症的宠物狗提供iNKT免疫疗法，这些狗没有其他可行的治疗选择。

安东尼奥·罗托洛(Antonio Rotolo)是宾夕法尼亚大学兽医学院免疫生物学研究助理教授。

尼古拉·梅森(Nicola J. Mason)是宾夕法尼亚大学兽医学院的医学和病理生物学教授。

其他共同作者是宾夕法尼亚大学兽医学院的Eoin C. Whelan、Matthew J. Atherton、Martina Piviani、Enrico Radaelli和Raimon Duran-Struuck，以及佩雷尔曼医学院的Irina Kulikovskaya、Danuta Jarocha、Joseph A. Fraietta、Michele M. Kim、Eric S. Diffenderfer和Keith A. Cengel。

这项工作得到了美国基因与细胞治疗学会、开曼化学女性研究基金和美国国立卫生研究院的资助(U24补充4-U24-CA-224122-02、U01 CA272270-01、KO8CA252619和P40-OD-010939)。