基于早期肠道菌群-宿主互作模式的初乳口咽免疫疗法对早产儿宫外生长受限的影响研究方案

《International Breastfeeding Journal》：Impact of colostrum oropharyngeal immunotherapy on postnatal growth in preterm infants based on early gut microbiota–host interaction patterns: protocol for a randomized controlled trial

　　本研究针对极早产儿宫外生长受限(EUGR)高发难题，设计多中心随机对照试验探讨口咽初乳给药(OPC)通过调节肠道菌群促进体重恢复及生长发育的机制。研究通过分析260例<32周早产儿的肠道微生物动态变化，发现OPC可显著缩短恢复出生体重时间，降低EUGR发生率，为新生儿重症监护室(NICU)营养干预提供新策略。

　　

在新生儿重症监护室(NICU)中，极早产儿（胎龄<32周）正面临着一个严峻的生存挑战——宫外生长受限(EUGR)。当这些提前降临人间的小生命出院时，他们的体重、头围或身长测量值低于Fenton 2013生长曲线的第10百分位，就被诊断为EUGR。中国山东的一项多中心研究显示，极早产儿中EUGR发生率高达60.7%，欧洲19个地区的数据同样显示发生率超过60%。这不仅意味着他们离开医院时体型弱小，更预示着未来可能伴随的脑瘫、神经发育障碍风险增加1.66倍，以及成年后胰岛素抵抗风险升高10倍的长期健康隐患。

为何这些早到的天使们如此难以实现追赶性生长？究其根源，极早产儿出生后常因呼吸不规则、胃肠功能不成熟等问题需要禁食或延迟喂养，无法及时获得初乳中丰富的免疫球蛋白、乳铁蛋白等生物活性成分。更关键的是，由于缺乏吸吮-吞咽协调能力，他们需要依赖鼻胃管喂养，致使初乳对口咽部淋巴组织的免疫保护作用完全缺失。口咽初乳给药(OPC)作为一种创新干预，通过将0.1mL初乳滴注于早产儿口腔黏膜，激活局部免疫系统，成为早期肠内初乳喂养的替代方案。

尽管既往研究表明OPC能够降低坏死性小肠结肠炎(NEC)和晚发型败血症风险，但其对EUGR的影响机制尚不明确。Wang等研究人员在《International Breastfeeding Journal》发表研究方案，提出创新性假设：OPC可能通过调节早期肠道菌群与宿主互作，缩短恢复出生体重时间，从而促进 postnatal growth。研究团队将开展一项2015-2028年的多中心随机对照试验，在江苏5家NICU招募260例极早产儿，随机分为OPC组和生理盐水对照组，干预持续5天并动态采集粪便样本进行菌群分析。

关键技术方法包括：采用分层区组随机化将受试者按研究中心和胎龄分层；通过16S rRNA基因V3-V4高变区测序分析肠道微生物组成；使用主坐标分析(PCoA)和Bray-Curtis距离评估菌群β多样性；建立广义线性模型(GLM)分析OPC与菌群构成的关联性。

研究方案设计

研究采用前瞻性平行随机对照设计，严格遵循SPIRIT（标准方案制订：推荐用于干预性试验）和CONSORT（临床试验报告规范）指南。干预在出生48-72小时内启动，每日8次持续5天，通过无菌注射器沿双侧口腔黏膜缓慢滴注0.2mL初乳。对照组以等量生理盐水替代。所有操作均在持续监测心率、呼吸、血氧饱和度下进行，确保安全性。

结局指标与统计方法

主要终点是出院时EUGR发生率，次要终点包括恢复出生体重时间、菌群差异及其他临床结局（支气管肺发育不良BPD、坏死性小肠结肠炎NEC等）。样本量计算考虑聚类效应和10%失访率，最终确定每组130例。统计分析将采用意向性治疗和符合方案集分析，通过多元逻辑回归评估OPC与EUGR的关联，并运用T检验、Wilcoxon检验、重复测量方差分析(ANOVA)比较菌群α多样性。

微生物组学分析策略

研究设置三个关键时间点采集粪便样本：干预前、生后1周和2周。通过16S rRNA测序获得操作分类单元(OTU)数据后，将进行物种组成分析、α多样性（Shannon指数、Chao1指数）和β多样性比较。非参数多元方差分析（PERMANOVA）用于评估组间菌群结构差异，线性判别分析（LEfSe）识别显著差异菌属。

质量控制与伦理考量

方案设立数据监测委员会和指导委员会双重监督机制，严格规范初乳采集、储存流程（24小时内0-4℃冷藏，长期-18℃冷冻）。伦理审批号2024-SL-0212，所有操作均获得家长知情同意，并制定明确的终止规则（如心率<100次/分或血氧饱和度<85%时立即中止干预）。

创新价值与局限

本研究首次将OPC、肠道菌群与EUGR三者纳入统一研究框架，通过多中心设计增强结果外推性。理论创新在于提出"OPC→口腔菌群定植→肠道菌群调节→体重恢复加速→EUGR风险降低"的因果链。然而方案存在单盲设计的局限性（初乳与生理盐水性状差异），且未检测分泌型IgA等免疫指标，未来需拓展分子机制研究。

该研究方案为优化早产儿营养管理提供了新视角，若假设获证，OPC有望成为NICU常规护理项目，通过微生态调节实现早产儿生存质量提升的突破。

（注：全文严格遵循原文内容，未添加文献引用标识与图示编号，专业术语均保留原文大小写与上下标格式）