伊朗西部人类和家养动物中 Blastocystis sp. 的亚型鉴定

《Veterinary Medicine and Science》：Subtype Identification of Blastocystis sp. Among Humans and Domestic Animals in the West of Iran

　　Blastocystis亚型在伊朗克尔曼沙省人畜中的分布及分子特征分析。本研究对820份样本（人类220份，牛220份，羊240份，鸽子140份）进行检测，发现人类显微镜阳性率9.1%，培养阳性率4.5%，显著与年龄≥60岁及胃肠道症状相关。分子分析鉴定出人类ST2亚型（3株）和牛羊ST5亚型（5株），构建的系统发育树和单倍型网络显示ST2与ST5存在明确遗传分化，提示潜在人畜共患病。

　　本研究聚焦于一种广泛分布于人类和动物肠道中的原生动物——Blastocystis，探讨其在伊朗克尔曼沙赫省人类与动物宿主中的亚型分布情况。通过对820份新鲜粪便样本进行分析，研究揭示了该寄生虫在不同宿主群体中的感染情况及其可能的传播途径，为理解其在该地区的流行病学特征和潜在的动物源性传播提供了重要依据。

首先，Blastocystis作为一种厌氧原生动物，具有广泛的宿主范围，不仅存在于人类肠道中，也常见于多种哺乳动物和鸟类。其感染率在全球范围内差异显著，尤其是在卫生条件较差的发展中国家，感染率往往较高。在伊朗，已有研究表明该寄生虫在人类和牲畜中均有较高的检出率，这提示其可能具有一定的动物源性传播潜力。然而，由于其形态学上的高度多态性，传统的显微镜检测方法在识别其亚型方面存在较大困难，因此需要借助分子生物学手段，如PCR扩增和DNA测序，来准确鉴定其亚型。

本研究采用了两种主要的检测方法：显微镜检查和培养法。通过对220名人类患者的粪便样本进行显微镜检测，发现有9.1%的样本中存在Blastocystis感染。而通过培养法检测，发现感染率为4.5%。这两种方法的结果存在差异，可能与样本中寄生虫的活性状态、环境条件以及检测方法本身的敏感性有关。显微镜检测虽然简便，但其灵敏度较低，尤其在寄生虫数量较少的情况下容易漏检，而培养法虽然更准确，但其操作流程复杂，且并非所有样本都能成功培养。

在动物样本中，研究共收集了220份牛的粪便样本，240份羊的样本以及140份鸽子的样本。通过显微镜检测，仅发现0.9%的牛样本存在Blastocystis感染，而羊和鸽子样本中未发现寄生虫感染。这表明在该地区，Blastocystis在牛中的感染率较低，而在羊和鸽子中则未检出。此外，所有动物样本在培养过程中均未出现寄生虫生长，这可能与动物宿主的生理条件不同，例如肠道pH值、温度等，影响了寄生虫的繁殖。

为了进一步明确感染的亚型，研究团队对10份人类样本和20份牛样本进行了分子生物学分析。通过对SSU rRNA基因的扩增和测序，研究确定了两种主要的亚型：ST2和ST5。其中，ST2仅在人类样本中被检测到，而ST5则在牛和羊样本中发现。值得注意的是，ST5在动物样本中占比较高，且其在人类中的存在已被多个研究报道。这表明ST5可能在不同宿主之间具有一定的传播能力，从而支持了该寄生虫的动物源性传播假说。

通过构建系统发育树和单倍型网络，研究团队进一步分析了Blastocystis在不同宿主中的遗传多样性。结果显示，ST2和ST5分别对应两个不同的单倍型群体。ST2的单倍型网络较为简单，仅包含两种单倍型，而ST5的网络呈现出星状结构，表明其可能经历了近期的种群扩张。这一发现为理解Blastocystis的进化历史和传播机制提供了新的视角，同时也揭示了不同亚型在宿主中的分布规律。

研究还发现，Blastocystis感染与年龄和胃肠道症状之间存在显著关联。在≥60岁的患者中，感染率达到了20%，远高于其他年龄段。这可能与老年人免疫系统功能下降、慢性疾病累积以及不良生活习惯有关。此外，感染个体中约有20.8%表现出胃肠道症状，如腹痛、腹泻等，而7.7%的个体则无任何症状。这一结果表明，Blastocystis感染不仅与宿主的生理状态有关，还可能与宿主的免疫反应和肠道环境密切相关。

尽管本研究未发现性别、居住地和职业与Blastocystis感染之间存在显著关联，但其在人类群体中的分布仍具有一定的特征。例如，职业为无业者和家政人员的个体感染率相对较高，这可能与他们的生活习惯、卫生条件以及接触污染源的机会有关。同时，不同亚型在宿主中的分布也呈现出一定的规律，如ST2主要出现在人类样本中，而ST5则在牛和羊中更为常见。这种亚型分布的差异可能反映了不同宿主对寄生虫的适应能力，或与宿主的免疫反应和肠道微环境有关。

研究团队还发现，ST5在人类和动物宿主中的存在具有一定的重叠性，这进一步支持了Blastocystis的动物源性传播可能性。例如，在一些研究中，ST5被报道在猪场工人和猪中同时存在，而在屠宰场工人和鸡中也有类似的发现。这表明ST5可能在不同宿主之间具有较高的传播潜力，尤其是在人类和动物之间形成交叉感染的可能。因此，对于该寄生虫的防控措施需要考虑其在动物宿主中的传播路径，尤其是在农业和畜牧业环境中。

此外，研究还强调了Blastocystis在人类中的潜在致病性。虽然该寄生虫在许多情况下被认为是无害的共生微生物，但也有研究指出其可能与某些胃肠道疾病相关。例如，一些研究表明ST5可能与溃疡性结肠炎的发生有关，这需要进一步的临床研究来验证。同时，该寄生虫在不同亚型与宿主之间的分布差异，也提示其可能在某些情况下具有一定的致病性，而其他情况下则表现为无症状携带状态。

为了更全面地了解Blastocystis的传播机制和致病潜力，研究团队建议开展更多基于分子生物学和全基因组测序的研究。这些研究不仅可以揭示该寄生虫的遗传多样性，还可以帮助确定其在不同宿主之间的传播路径，以及其可能的致病机制。此外，进一步的流行病学调查和临床研究对于评估Blastocystis在公共卫生领域的潜在影响至关重要。

本研究的发现对于制定有效的防控策略具有重要意义。首先，由于Blastocystis感染与年龄和胃肠道症状密切相关，建议加强对老年人群体的健康监测，尤其是在卫生条件较差的地区。其次，由于ST5在动物宿主中较为常见，且可能在人类中传播，因此需要加强对农业和畜牧业环境的卫生管理，减少人与动物之间的交叉感染风险。最后，由于该寄生虫的分子鉴定和传播机制仍存在诸多未解之谜，建议未来研究更多地结合分子生物学和生态学方法，以更深入地探讨其在不同宿主之间的传播模式和致病机制。

总的来说，本研究通过系统的样本采集、分子检测和数据分析，揭示了Blastocystis在克尔曼沙赫省人类和动物宿主中的感染情况及其亚型分布特征。研究结果不仅为理解该寄生虫的传播路径提供了重要线索，也为未来的研究方向和防控措施奠定了基础。然而，由于样本数量和检测方法的限制，研究结果仍需在更大规模的样本中进行验证。此外，进一步的分子流行病学研究和临床研究将有助于更全面地揭示Blastocystis的生态学和病理学特征，从而为公共卫生政策的制定提供科学依据。