基于细胞膜固相色谱与微透析代谢组学技术探索柴胡疏肝散抗卒中后抑郁的药效物质基础及作用机制

　　本研究创新性地结合细胞膜固相色谱(CMSPC)与脑微透析代谢组学技术，系统揭示柴胡疏肝散(CSS)抗卒中后抑郁(PSD)的药效物质基础。研究发现8种HT22细胞特异性结合成分，其中7种能显著提升脑源性神经营养因子(BDNF)水平。海马代谢组学鉴定出13种差异代谢物，证实谷胱甘肽代谢通路是CSS抗PSD的关键靶点，为中药复方机制研究提供了多维度技术整合范式。

　　

Highlight

模型建立的创新与验证

抑郁是卒中后常见并发症，其发病机制复杂且严重影响患者生活质量及康复进程。CSS作为天然中药复方能有效改善抑郁症状。细胞与动物模型是药物研究的重要手段，当前PSD研究多基于动物模型，细胞模型则多采用单一抑郁造模方式（如皮质酮诱导或缺氧缺糖处理）。本研究创新性地联合氧糖剥夺(OGD)与皮质酮(CORT)刺激构建HT22细胞损伤模型，模拟卒中后抑郁的双重病理特征，并通过体内外实验验证模型的可靠性。

结论

本研究建立的HPLC-UV指纹图谱方法可用于冻干CSS产品的质量控制。细胞实验表明，除川陈皮素(Nobiletin)外，橘皮素(Tangeretin)、橙皮苷(Hesperidin)、柚皮素(Naringenin)、甘草酸(Glycyrrhizinic Acid)、异甘草素(Isoliquiritigenin)、芍药内酯苷(Albiflorin)及柚皮苷(Naringin)均对OGD+CORT诱导的HT22细胞损伤模型具有保护作用，并能显著提升细胞BDNF相对水平。通过细胞膜固相色谱筛选的CSS迁移成分与海马代谢组学发现的差异代谢物共同作用于谷胱甘肽代谢通路，分子对接证实特异性结合成分与靶蛋白具有良好的结合能力，多维技术联用为阐明中药复方药效物质基础提供了新策略。