基于全人源抗EpCAM抗体的近红外光免疫疗法，用于治疗食管胃交界腺癌

《Cancer Science》：Near-Infrared Photoimmunotherapy Targeting Esophagogastric Junction Adenocarcinoma With Fully Human Anti-EpCAM Antibody

　　本研究通过免疫组化分析46例EGJ腺癌患者肿瘤样本，发现EpCAM表达率高达98%且异质性最优（93%），故选用抗EpCAM单抗adecatumumab。体外及体内实验显示，adecatumumab-IR700（DAR2）通过近红外光免疫疗法显著抑制肿瘤生长并改善预后。

　　在癌症治疗领域，近年来涌现出多种新型技术，其中近红外光免疫治疗（Near-infrared Photoimmunotherapy, NIR-PIT）作为一种靶向治疗手段，因其具有高度的选择性和相对较低的副作用，引起了广泛关注。NIR-PIT的核心原理是利用单克隆抗体（monoclonal antibody, mAb）与光敏剂的结合物，在近红外光照射下引发细胞损伤，从而实现对肿瘤细胞的精准打击。该技术已被成功应用于治疗复发性头颈癌，并在临床前研究中显示出对多种癌症类型的潜力。然而，为了进一步拓展其应用范围，特别是在胃食管交界部腺癌（Esophagogastric Junction Adenocarcinoma, EGJ adenocarcinoma）中，识别一种表达水平高且分布均匀的靶点显得尤为重要。

本研究旨在评估EGJ腺癌中三种主要抗原——表皮生长因子受体（Epidermal Growth Factor Receptor, EGFR）、人表皮生长因子受体2（Human Epidermal Growth Factor Receptor 2, HER2）以及上皮细胞粘附分子（Epithelial Cell Adhesion Molecule, EpCAM）的表达情况和分布均匀性。通过分析46例接受手术治疗的EGJ腺癌患者的组织样本，研究发现EpCAM的表达率高达98%，并且其在肿瘤中的分布最为均匀，达到93%。这一结果表明，EpCAM是NIR-PIT的理想靶点，因为其高表达和均匀分布特性能够显著提高治疗的靶向性和有效性。相比之下，EGFR和HER2的表达率分别为22%和13%，且在不同病理类型中存在较大差异，尤其是HER2在弥漫型肿瘤中几乎不表达，这限制了其作为通用靶点的适用性。

为了进一步验证EpCAM作为NIR-PIT靶点的可行性，研究团队选择了针对EpCAM的全人源单克隆抗体——Adecatumumab，并将其与光敏剂IR700进行偶联，形成Adecatumumab-IR700复合物。在不同的偶联比例（Dye-Antibody Ratio, DAR）下，包括DAR2、DAR4和DAR7，对OE19细胞系和小鼠异种移植模型进行了实验。实验结果显示，DAR2的Adecatumumab-IR700在体外和体内均表现出最佳的治疗效果与最小的副作用之间的平衡。这表明，在选择光敏剂与抗体的偶联比例时，需兼顾其结合效率与安全性，避免因过高的偶联比例导致抗体结构破坏，进而影响其与靶点的结合能力。

在体外实验中，Adecatumumab-IR700在激光照射后3小时内诱导OE19细胞形成水泡，而对照组（使用IgG-IR700）则未观察到明显变化。这一现象支持了NIR-PIT的机制，即光敏剂与抗体结合后，当受到近红外光照射时，会引发细胞膜的物理变化，如渗透压失衡和膜破裂，从而导致细胞死亡。而在体内实验中，不同DAR的Adecatumumab-IR700在小鼠模型中均显示出对肿瘤的抑制作用，但随着DAR的增加，副作用如水肿的发生率也随之上升。特别是DAR7组，出现了较高的水肿发生率，表明过高的偶联比例可能导致非特异性毒性，这在临床应用中需要特别关注。

此外，研究还探讨了Adecatumumab在体内的分布特性。通过荧光成像技术，发现Adecatumumab-IR700在肿瘤组织中具有良好的靶向性，且在注射后1天内达到最高荧光强度，随后逐渐下降。这说明该抗体能够有效识别并结合肿瘤细胞，同时在体内具有一定的稳定性。然而，DAR4和DAR7组的肿瘤-背景比值低于DAR2组，表明较高的偶联比例可能影响抗体的结合效率，进而降低其治疗效果。

从临床意义来看，EpCAM在EGJ腺癌中的高表达和均匀分布为NIR-PIT的应用提供了良好的基础。在EGJ腺癌的病理特征中，多数患者存在Barrett’s食管，而EpCAM在Barrett’s食管中的表达率也高达97%。这一发现表明，EpCAM不仅在肿瘤细胞中表达，也在癌前病变中存在，因此在治疗过程中可以同时靶向肿瘤细胞和Barrett’s食管，减少漏诊和治疗盲区。此外，研究还指出，尽管Adecatumumab在早期临床试验中显示出良好的安全性，但其抗肿瘤效果有限，这可能与其在细胞内的内化程度有关。然而，在NIR-PIT中，抗体的内化并非必需，因为光敏剂与细胞膜的结合即可引发细胞死亡，因此Adecatumumab在这一应用中的表现具有潜力。

研究的局限性主要体现在样本数量和多样性方面。由于目前缺乏其他类型的EGJ腺癌细胞系，研究仅使用OE19细胞系进行实验，这可能影响结果的普遍适用性。同时，研究仅评估了短期内的治疗效果，未进行长期观察，这可能无法全面反映NIR-PIT的长期安全性和疗效。此外，Adecatumumab在体内的长期作用机制仍需进一步研究，尤其是在临床环境中如何优化其使用，以确保最大化的治疗效果并最小化副作用。

总体而言，本研究通过系统分析EGJ腺癌中EpCAM的表达和分布情况，结合NIR-PIT的实验验证，明确了EpCAM作为该类癌症治疗靶点的可行性。Adecatumumab-IR700在体外和体内均表现出良好的治疗效果，尤其在DAR2条件下，能够有效减少肿瘤体积并改善预后。尽管高DAR的偶联物可能带来一定的副作用，但研究结果提示，适当选择偶联比例可以实现治疗效果与安全性之间的最佳平衡。未来，随着更多相关研究的开展，NIR-PIT在EGJ腺癌中的应用有望成为一种安全、有效的治疗手段，为患者提供新的治疗选择。