RNA靶向RUNX1C可增强化学敏感性。A、示意图…… 开放获取

《Blood Cancer Discovery》：RNA targeting of RUNX1C enhances chemosensitivity. A, Schematic of the tw... Open Access

　　化疗耐药性在急性髓性白血病（AML）复发中起关键作用。本研究通过配对RNA测序分析发现，AML复发患者中RUNX1C长异构体显著上调，其机制与近端启动子P2的DNA甲基化升高相关，而甲基化调控导致RUNX1A/B异构体表达下降。RUNX1C通过激活BTG2促进白血病细胞周期停滞和化疗耐药，BTG2通过去腺苷化作用降低rRNA稳定性，从而减少蛋白质合成。利用CRISPRa激活RUNX1C启动子或敲低BTG2显著增强化疗敏感性。RNA靶向治疗（如Cas13或ASO）可有效抑制RUNX1C表达，逆转化疗耐药并诱导白血病细胞凋亡。该研究揭示了RUNX1C-BTG2轴在AML耐药中的新机制，并为开发RNA疗法提供了依据。

　　急性髓系白血病（AML）是一种在成年人中最为常见的急性白血病类型。尽管标准的“7 + 3”化疗方案（包括阿糖胞苷和蒽环类药物）能够实现较高的初始缓解率，但仍有大约50%至80%的患者会在治疗后5年内复发，且复发后临床预后较差，尤其在老年患者中更为常见。复发通常与某些耐药细胞群体有关，这些细胞在治疗期间能够维持活性，成为最小残留疾病（MRD）的潜在储存库。因此，理解AML中耐药机制的分子基础，对于开发更有效的治疗策略至关重要。

本研究通过分析AML患者治疗前和复发后骨髓样本中的RNA异构体变化，揭示了异构体表达水平和结构异常是许多癌症，包括AML的关键特征。研究人员发现，在AML复发过程中，一种名为RUNX1C的长异构体表达显著上调，而这种上调与DNA甲基化在RUNX1基因的近端启动子区域的异常有关。通过利用DNA甲基化和转录因子结合的替代启动子，研究团队进一步发现，RUNX1C的表达不仅受其自身启动子调控，还可能通过调控其他基因的表达来促进化疗耐药性。RUNX1C的N端区域在调控化疗反应中发挥关键作用，能够引导特定的转录程序，从而促进细胞周期阻滞和化疗耐药性。此外，RUNX1C的直接靶标BTG2在化疗耐药中起着重要作用，它通过促进rRNA的去腺苷化，减少mRNA的表达和稳定性，从而降低蛋白质合成速率，使细胞进入静止状态。

在实验中，研究人员利用CRISPR技术对RUNX1C进行靶向编辑，发现RUNX1C的缺失能够增强AML细胞对化疗药物的敏感性，而RUNX1C的表达上调则导致细胞进入静止状态，从而降低治疗效果。同时，通过RNA靶向策略，如使用Cas13和ASO（反义寡核苷酸）技术，研究人员能够有效降低RUNX1C的表达，进而增强化疗效果。这些发现为AML复发提供了新的治疗策略，即通过调控RUNX1C的表达来改善化疗效果。

此外，研究还揭示了RUNX1C与BTG2之间的调控关系。RUNX1C通过其N端区域调控BTG2的表达，而BTG2则通过促进rRNA的去腺苷化，减少全局蛋白质合成，从而促进AML细胞的静止状态和化疗耐药性。研究团队还发现，RUNX1C的表达变化与某些炎症信号通路（如IFNγ信号）相关，这些信号可能在AML的复发和耐药中起到重要作用。这些发现不仅加深了对AML耐药机制的理解，还为未来治疗提供了新的靶点。

在方法部分，研究采用了多种实验技术，包括RNA测序（RNA-seq）、全基因组DNA甲基化分析、CRISPR-Cas9基因编辑、RNA干扰（RNAi）以及流式细胞术等。通过对这些技术的综合应用，研究团队能够准确地鉴定RUNX1C和BTG2的表达水平及其在细胞周期和药物反应中的作用。同时，研究还涉及了样本的收集、处理和分析，确保实验结果的可靠性和可重复性。

在讨论部分，研究团队强调了RUNX1C和BTG2在AML耐药中的关键作用，并提出了通过RNA靶向策略来干预这些基因表达的潜在治疗方案。研究还指出，虽然RNA靶向技术在实验室中展现出良好的效果，但在临床应用中仍面临稳定性、递送效率等挑战。因此，进一步优化这些技术以提高其在体内的疗效和安全性，是未来研究的重点。

总体而言，这项研究通过多方面的实验分析，揭示了RUNX1C在AML耐药中的核心作用，为AML的治疗提供了新的思路和方法。这些发现不仅有助于理解AML复发的机制，还为开发新的治疗策略提供了科学依据。