DNAJC5通过BiP/IRE1α/XBP1内质网应激通路诱导自噬促进上皮性卵巢癌顺铂耐药的研究

《Scientific Reports》：DNAJC5 promotes cisplatin resistance in epithelial ovarian cancer by autophagy induced by the BiP/IRE1α/XBP1 endoplasmic reticulum stress pathway

　　本研究针对上皮性卵巢癌(EOC)患者顺铂(DDP)耐药这一临床难题，揭示了DNAJC5通过激活BiP/IRE1α/XBP1内质网应激通路诱导保护性自噬的新机制。研究人员通过体内外实验证实，抑制DNAJC5或IRE1α可显著增强EOC细胞对DDP的敏感性，为逆转铂类耐药提供了新的潜在靶点。

　　

卵巢癌作为妇科恶性肿瘤中死亡率最高的疾病类型，其治疗面临严峻挑战。尽管以顺铂(DDP)为基础的化疗方案是标准一线治疗，但原发性或获得性耐药的出现导致近75%患者复发，五年生存率不足35%。这种耐药性迫使临床提高DDP剂量，进而引发严重毒性反应，因此揭示耐药机制成为改善预后的关键。

近年来，自噬（autophagy）被证实是EOC化疗耐药的重要机制。这一细胞内自我消化过程在内质网应激（ER stress）条件下被激活，通过为细胞提供必需蛋白质和ATP来维持生存。然而，癌细胞如何精确调控自噬过程以抵抗化疗药物攻击，仍是未解之谜。

DNAJC5作为DnaJ热休克蛋白家族成员，在神经系统中扮演重要角色，但其在肿瘤进展中的作用逐渐受到关注。初步临床数据显示，DNAJC5可能与EOC进展存在关联，这激发了研究团队深入探索的兴趣。

研究人员首先通过TCGA数据库分析发现，DNAJC5高表达与卵巢癌患者不良预后显著相关。

对67例EOC样本的免疫组化分析显示，DNAJC5主要定位于细胞质，其表达水平与国际妇产科联盟分期呈正相关，III/IV期肿瘤的免疫组化评分显著高于I/II期。此外，DNAJC5高表达与CA125水平升高密切相关，提示其作为EOC恶性进展标志物的潜力。

功能实验表明，在A2780细胞中过表达DNAJC5可显著增强对DDP的耐药性，IC₅₀值升至19.51μM，同时DDP诱导的凋亡明显减少。

相反，在耐药细胞系A2780/DDP中敲低DNAJC5可使DDP的IC₅₀降低65%，并显著增加凋亡细胞比例，证实了DNAJC5在介导DDP耐药中的关键作用。

机制探索方面，RNA测序显示DNAJC5过表达细胞中"内质网应激反应"通路显著富集。Western blot验证发现DNAJC5特异性激活BiP-IRE1α-XBP1信号轴，增加磷酸化IRE1α和剪接型XBP1s表达，而对PERK和ATF6分支影响较小。免疫共沉淀实验证实DDP处理可促进DNAJC5与BiP的结合。

自噬水平检测显示，DNAJC5过表达提高LC3-II/LC3-I比值和Beclin-1表达，降低P62水平；而敲低DNAJC5则产生相反效果。用自噬抑制剂氯喹处理或IRE1α抑制剂4μ8C干预均可逆转DNAJC5介导的DDP耐药，证实了ER应激-自噬轴在其中的核心地位。

动物实验进一步验证了上述发现。裸鼠移植瘤模型显示，DNAJC5过表达肿瘤对DDP治疗不敏感，肿瘤抑制率显著低于对照组。IHC分析表明DNAJC5+DDP组中BiP-IRE1α-XBP1-LC3信号通路持续激活。

本研究采用的关键技术方法包括：TCGA数据库生物信息学分析、67例临床样本免疫组化评估、细胞系构建与功能验证（CCK-8、克隆形成、Transwell、划痕实验）、RNA测序与生物信息学分析、蛋白互作检测（Western blot、免疫共沉淀）、动物模型建立等。

DNAJC5促进DDP耐药在EOC细胞中的机制研究表明，该蛋白通过调控BiP-IRE1α-XBP1通路诱导保护性自噬。临床样本分析显示DNAJC5高表达与EOC不良预后相关。功能实验证实干预DNAJC5可影响EOC细胞对DDP的敏感性。机制探索揭示DNAJC5与BiP互作激活IRE1α-XBP1信号。自噬水平检测证明DNAJC5通过ER应激诱导自噬。通路抑制实验表明靶向IRE1α可逆转耐药表型。体内实验验证DNAJC5在动物模型中促进DDP耐药。

研究结论强调，DNAJC5通过激活BiP-IRE1α-XBP1信号通路诱导自噬，进而促进EOC的DDP耐药。这一发现不仅深化了对EOC化疗耐药机制的理解，还为临床逆转铂类耐药提供了新的潜在靶点。尽管DNAJC5在不同EOC细胞系中的作用存在异质性，但本研究为开发针对DNAJC5或其下游信号通路的治疗策略奠定了理论基础，对改善EOC患者预后具有重要意义。该论文发表于《Scientific Reports》期刊，为EOC耐药研究领域提供了新的视角和实验依据。