基于MALDI-ToF质谱的EXENT?分析仪免疫球蛋白同种型检测在单克隆丙种球蛋白病初筛中的M蛋白临界值研究

《Clinical Chemistry》：B-348 M protein cut-off for initial evaluation of monoclonal gammopathies with the Immunglobulin Isotypes (GAM) for the EXENT? analyzer MALDI-ToF assay

　　本研究针对MALDI-ToF质谱检测低水平M蛋白可能导致MGUS过度诊断的问题，通过建立EXENT?分析仪免疫球蛋白同种型(GAM)检测的临床临界值，发现健康人群中11.0%存在M蛋白，确立IgG(0.359 g/L)、IgA(0.325 g/L)和IgM(0.227 g/L)的临界值，与免疫固定电泳一致性达85%，为单克隆丙种球蛋白病的精准初筛提供重要依据。

　　

在血液系统疾病诊断领域，单克隆丙种球蛋白病（monoclonal gammopathies）的早期识别一直存在诊断灵敏性与临床过度干预的矛盾。基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-ToF MS）作为新兴检测技术，虽然能灵敏检测微量M蛋白（monoclonal protein），有助于多发性骨髓瘤（MM）患者的疗效监测，但若在普通人群筛查中滥用，可能导致对意义未明的单克隆丙种球蛋白病（MGUS）的过度诊断，引发不必要的医疗随访和患者焦虑。这一困境的核心在于缺乏针对健康个体M蛋白水平的科学临界值标准。

为破解这一难题，由Gabriella Lakos领衔的研究团队在《Clinical Chemistry》发表论文，首次基于健康人群队列建立了EXENT^?分析仪免疫球蛋白同种型（GAM）检测的临床临界值。研究团队采用横断面研究设计，对364名美国健康志愿者（中位年龄57岁）血清样本进行检测，通过非参数百分位数法分别确立IgG（95百分位数）、IgA和IgM（99百分位数）的临界值，并与传统血清蛋白电泳（SPE）和免疫固定电泳（IFE）进行比对验证。

关键技术方法包括：采用EXENT^?分析仪MALDI-ToF质谱平台进行免疫球蛋白同种型（GAM）检测；建立包含364名健康志愿者的多族裔美国人群队列；通过非参数百分位数法计算临界值；使用血清蛋白电泳（SPE）和免疫固定电泳（IFE）作为参照标准进行方法学验证。

研究结果

背景与目标：针对MALDI-ToF质谱检测低浓度M蛋白可能引发MGUS过度诊断的问题，研究旨在确立EXENT GAM检测法在单克隆丙种球蛋白病初筛中的临床临界值。通过分析健康人群数据，建立与MGUS自然亚型分布相匹配的临界标准（IgG占70%，IgA/IgM占30%）。

方法：研究纳入364名表面健康志愿者（188名男性，176名女性），采用EXENT GAM检测法对所有样本进行M蛋白定量。按浓度和同种型对检测出的M蛋白进行分级，分别针对IgG、IgA和IgM采用不同的百分位数界限（IgG为95%，IgA/IgM为99%）建立临界值。

结果：在59.3%（216/364）的样本中检测到M蛋白，其中27.4%低于检测下限。确立的临界值为IgG 0.359 g/L（95%CI:0.224-0.866）、IgA 0.325 g/L（0.133-2.320）和IgM 0.227 g/L（0.132-0.829）。超过临界值的样本占比11.0%（40/364），其同种型分布显示IgG单克隆占比最高（3.0%），与MGUS流行病学特征相符。在与传统方法的251例比对中，EXENT GAM与IFE的一致性达85%（将不确定结果视为阴性）或81%（视为阳性）。

结论与讨论：本研究首次建立基于人群的MALDI-ToF质谱M蛋白临界值体系。采用差异化同种型临界值（IgG用95百分位数，IgA/IgM用99百分位数）既反映了MGUS的自然分布特征，又有效平衡了检测灵敏度与特异性。与免疫固定电泳的高度一致性表明，该临界值体系可作为单克隆丙种球蛋白病初筛的有效工具，在保证多发性骨髓瘤疗效监测灵敏度的同时，避免对良性MGUS的过度诊断。这一研究成果为MALDI-ToF质谱技术在临床实践中的合理应用提供了重要标准，推动了精准医疗在血液肿瘤诊断领域的发展。