液相色谱-串联质谱法用于同时定量血浆中的四种内源性大麻素及其类似物质：在HIV和丙型肝炎病毒共感染人群中的应用

《Therapeutic Drug Monitoring》：Liquid Chromatography–Tandem Mass Spectrometry Method for Simultaneous Quantification of Four Endocannabinoids and Endocannabinoid-Like Substances in Plasma: Application in an HIV—Hepatitis C Virus Coinfected Population

　　内源性大麻素系统在免疫、炎症和代谢调节中起重要作用，但其不稳定性和复杂性导致血浆中内源性大麻素（AEA、2-AG/1-AG、OEA、PEA）定量困难。本研究建立LC-MS/MS方法，检测限达0.1-0.5 mcg/L，线性良好（R2≥0.995），并通过严格方法学验证。预实验发现延迟离心和冰冻后储存显著影响浓度，需标准化前处理。该方法成功应用于HIV/HCV共感染患者，为临床研究提供可靠工具。

　　

背景：

内源性大麻素系统调节免疫功能、炎症和代谢，在临床研究中受到越来越多的关注。然而，内源性大麻素（ECs）及其类似物质（EC-like）的不稳定性、低丰度以及复杂的物理化学性质使得在血浆中对其进行定量分析变得具有挑战性。

目的和方法：

作者开发并验证了一种液相色谱-串联质谱方法，用于同时定量人血浆中的N-花生四烯酰乙醇胺（AEA）、2-花生四烯酰甘油及其异构体1-花生四烯酰甘油（2-AG/1-AG）、油酰乙醇胺（OEA）和棕榈酰乙醇胺（PEA）。

结果：

提取采用液-液萃取结合液相色谱-串联质谱技术进行。该方法对AEA的定量下限为0.1 mcg/L，对2-AG/1-AG的定量下限为0.2 mcg/L，对OEA和PEA的定量下限为0.5 mcg/L；校准曲线显示出较高的线性（R2 ≥ 0.995）。实验内和实验间的准确性和精度均在15%以内。其他验证参数（包括选择性、回收率、携带效应、基质适用性和稀释完整性）均符合监管要求。预分析处理对浓度有显著影响：延迟离心和解冻后储存会提高AEA、OEA和PEA的水平。该验证方法应用于同时感染HIV和丙型肝炎病毒的患者血浆样本，实现了对临床相关人群中内源性大麻素及其类似物质的可重复定量。

结论：

研究表明，生物学和技术因素会显著影响血浆中内源性大麻素及其类似物质的浓度。因此，标准化的预分析处理对于准确测量至关重要，所提出的方法为临床和药理学研究提供了可靠的工具。

通俗语言总结：研究人员开发了一种新的方法，利用液相色谱-串联质谱技术来测量人血浆中的特定内源性大麻素及相关物质。该方法能够准确定量N-花生四烯酰乙醇胺、2-花生四烯酰甘油及其异构体1-花生四烯酰甘油、油酰乙醇胺和棕榈酰乙醇胺，实验内和实验间的准确性和精度均在15%以内。研究发现，延迟离心和解冻后储存等因素会改变这些物质的水平，这突显了标准化样本处理的必要性。该验证方法已成功应用于同时感染HIV和丙型肝炎病毒的患者，实现了对临床相关人群中内源性大麻素及相关物质的可重复定量。

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