通过两种不同的基于化学发光免疫测定的分析方法测定他克莫司（FK-506）的浓度：一项比较性横断面研究

《Medicine》：Tacrolimus (FK-506) levels determined by 2 different chemiluminescence immunoassay-based analytical methods: A comparative cross-sectional study

　　本研究比较了Snibe MAGLUMI 800与Abbott ARCHITECT i1000SR两种化学发光免疫分析法在肾移植患者血药浓度检测中的性能。结果显示，两种方法高度相关（R=0.916，ICC=0.934），但MAGLUMI存在0.17 ng/mL中位正偏差，尤其在较高浓度时差异更显著，可能因代谢物交叉反应引起。结论：MAGLUMI可靠但需注意系统偏差。

　　本研究旨在评估两种化学发光免疫分析方法在测量肾移植患者全血中他克莫司浓度方面的性能差异。他克莫司是一种常用的免疫抑制剂，主要用于预防器官移植后的排斥反应，特别是在肾移植患者中。由于其治疗窗狭窄，个体间药代动力学差异较大，因此对患者进行治疗药物监测（TDM）至关重要。TDM可以帮助医生调整药物剂量，确保患者获得最佳疗效，同时减少药物毒性的风险。

目前，多种方法被用于他克莫司浓度的测定，包括酶联免疫吸附测定（ELISA）、微粒子酶免疫测定（MEIA）、化学发光微粒子免疫测定（CMIA）、高效液相色谱法（HPLC）以及液相色谱-串联质谱法（LC/MS/MS）等。其中，自动化免疫分析系统因其操作简便、检测速度快而成为临床常规选择。然而，不同检测系统对同一样本的结果可能存在差异，这要求对各种免疫分析方法进行一致性评估。为了进一步提高检测效率，研究者们不断改进检测技术，使自动化免疫分析系统在精度和稳定性方面得到提升。

在本研究中，选择了两种在尼泊尔广泛使用的化学发光免疫分析方法：化学发光微粒子免疫测定（CMIA）和化学发光免疫测定（CLIA）。这两种方法分别由Abbott Diagnostics和Snibe Diagnostics提供。研究纳入了257名接受他克莫司治疗的肾移植患者，通过比较两种方法的检测结果，分析其相关性和一致性。研究结果显示，两种方法之间存在高度相关性，相关系数达到0.916，且统计学意义显著（P < 0.001）。此外，使用内窥镜相关系数（ICC）评估检测结果的可靠性，结果显示ICC值为0.934（95% CI = 0.915–0.949），表明两种方法的测量结果具有极高的可信度。

尽管两种方法的检测结果高度相关，但进一步的分析表明，Snibe MAGLUMI方法在测量他克莫司浓度时存在轻微的正向偏差。具体而言，Snibe MAGLUMI方法的检测结果平均比Abbott ARCHITECT方法高出0.385 ng/mL，且中位数差异为0.17 ng/mL，对应的中位数百分比差异为3.4%。这种偏差可能与Snibe MAGLUMI平台中抗他克莫司单克隆抗体对药物代谢产物的交叉反应有关。他克莫司在体内代谢后会产生多种代谢产物，这些代谢产物可能与免疫分析方法中的抗体发生反应，从而导致检测结果的偏高。这种交叉反应在某些免疫分析系统中是常见的现象，尤其在代谢产物浓度较高的情况下更为明显。

为了更直观地展示两种方法之间的差异，研究者采用了Bland-Altman图进行分析。该图显示，在低浓度范围内，两种方法的检测结果较为一致，而在高浓度范围内则出现了较大的差异。这种差异可能是由于不同检测方法对代谢产物的识别能力不同，或者是在样本处理过程中某些因素对结果产生了影响。因此，对于高浓度样本的检测，需要更加谨慎地评估两种方法之间的差异，并考虑其对临床决策的影响。

研究还提到，虽然高效液相色谱-串联质谱法（HPLC-MS/MS）被认为是测量他克莫司浓度的“金标准”，但由于其成本较高、操作复杂，以及对实验室条件的要求较严格，这种方法在小型实验室或发展中国家的应用受到一定限制。相比之下，自动化免疫分析系统因其简便性和快速性，成为临床实践中更受欢迎的选择。然而，由于不同方法之间存在一定的偏差，临床医生在解读检测结果时需要充分了解这些差异，并在必要时进行校正或使用其他参考方法进行验证。

此外，研究还指出，不同检测方法之间的差异可能与样本处理过程中的某些因素有关，例如样本中蛋白质的结合情况、代谢产物的存在以及检测方法本身的灵敏度和特异性。例如，在肾移植早期，患者体内的白蛋白浓度可能较低，这可能会影响他克莫司的游离浓度，进而导致检测结果的偏差。因此，在解读他克莫司浓度时，除了关注数值本身，还需要考虑患者的个体差异和检测方法的特性。

研究的局限性在于，它仅在单一中心进行，因此其结果可能无法完全推广到更广泛的肾移植人群。此外，由于缺乏标准化的参考材料，不同检测方法之间的比较仍然存在一定的挑战。目前，他克莫司的全血标准参考材料（ERM-DA110a）是唯一的可用材料，因此在评估不同方法的准确性时，仍需依赖这一参考材料进行验证。

总体而言，本研究的结果表明，Snibe MAGLUMI方法在测量他克莫司浓度方面具有良好的相关性和可靠性，尽管存在轻微的正向偏差。这一偏差可能是由于代谢产物的交叉反应引起的，因此在临床应用中需要注意其对剂量调整的影响。对于某些特定情况，例如高浓度样本或新接受移植的患者，使用Snibe MAGLUMI方法可能会导致与Abbott ARCHITECT方法的检测结果不一致，因此需要结合其他检测手段或临床信息进行综合判断。研究建议，临床医生在使用不同检测方法时应保持警惕，并通过持续教育和培训来提高对检测结果差异的理解，从而确保患者获得最佳的治疗效果。