靶向cccDNA的半乳糖工程化双重响应纳米载体递送ASO/CRISPR-Cas9系统抑制HBV复制

　　本研究针对乙型肝炎病毒（HBV）治愈难题，开发了一种集成CRISPR/Cas9基因编辑与反义寡核苷酸（ASO）技术的肝靶向纳米载体UACPG。该系统通过半乳糖配体实现肝脏特异性递送，并利用RNase H降解与近红外光激活双重响应机制精准释放Cas9核糖核蛋白复合物及ASO，有效降解HBV cccDNA和pgRNA。实验证实该策略显著降低病毒复制与抗原水平，且未观察到明显脱靶效应，为根治HBV提供了创新性技术平台。

　　

通过工程化改造的半乳糖修饰双重响应纳米载体（UACPG），研究人员开发了一种协同治疗策略：利用CRISPR/Cas9系统靶向破坏乙型肝炎病毒（HBV）的共价闭合环状DNA（cccDNA），同时通过反义寡核苷酸（ASO）特异性降解前基因组RNA（pgRNA）。该纳米载体具备低免疫原性、高负载能力和双重刺激响应特性，其表面偶联的靶向配体可实现肝脏特异性递送，并通过RNase H依赖性降解和近红外（NIR）光激活实现Cas9核糖核蛋白复合物与ASO的按需释放。在 hydrodynamic HBV 感染小鼠模型中，UACPG有效抑制了病毒复制和抗原表达，显著降低cccDNA水平，且未观察到明显脱靶效应。该技术实现了基因编辑系统的时空可控释放，为根治HBV提供了创新性治疗平台。