2024年巴西亚马逊奥罗普切病毒病暴发：临床与实验室特征及其与登革病毒的差异化研究

　　本刊推荐：本研究系统分析了2024年巴西马瑙斯奥罗普切病毒（OROV）暴发期间的临床与免疫学特征，通过实时PCR（RT-PCR）和空斑减少中和试验（PRNT）技术，揭示OROV感染者更易出现严重头痛、关节痛及皮疹症状，并发现特异性细胞因子（CCL11、CXCL10、IFN-γ等）的急性期高表达。研究强调了在虫媒病毒共流行地区开展综合征鉴别诊断的重要性，为公共卫生应对提供关键数据。

　　

背景

奥罗普切病毒（OROV）是一种由库蠓（Culicoides paraensis）和致倦库蚊（Culex quinquefasciatus）传播的虫媒病毒，近年来在南美洲及加勒比地区呈现扩散趋势。2024年，巴西马瑙斯地区暴发了大规模OROV疫情，且与登革病毒（DENV）疫情重叠，由于两者临床症状高度相似（如发热、头痛、肌痛、关节痛等），给临床鉴别诊断带来极大挑战。本研究旨在通过前瞻性队列研究，比较OROV与DENV感染者的临床特征、实验室参数及免疫应答差异，为疫情控制和临床管理提供依据。

方法

研究设计及伦理

本研究经Funda??o de Medicina Tropical-Doutor Heitor Vieira Dourado（FMT-HVD）伦理委员会批准（批准号CAAE: 67595417.0.0000.0005），所有参与者均签署知情同意书。2024年1月至3月期间，在马瑙斯一家三级传染病医院连续招募年龄超过5岁、急性发热（病程<7天）的患者。排除疟疾感染者后，共收集644份血清样本，最终纳入51例OROV感染者、78例DENV感染者及5例OROV-DENV共感染者。

实验室诊断

OROV检测采用血清和尿液样本的实时PCR（RT-PCR）技术，并通过空斑减少中和试验（PRNT）对D1（入院日）和D28（第28天）的血清样本进行中和抗体滴度测定。若D28中和抗体滴度较D1升高≥4倍，则判定为OROV阳性。登革病毒诊断则采用NS1抗原检测、IgM ELISA及分子检测（ZDC试剂盒），并排除寨卡病毒和基孔肯雅病毒感染。

病毒基因分型

对RT-PCR阳性样本进行全基因组测序，使用Illumina MiSeq平台进行扩增子测序，并通过最大似然法构建系统发育树，分析病毒株的进化关系。

免疫标志物检测

使用Luminex xMAP技术检测D1和D28血清中25种细胞因子和趋化因子的浓度，包括CCL11（eotaxin）、CXCL10、IFN-γ、IL-1RA、IL-10等。

统计分析

采用卡方检验、t检验、曼-惠特尼U检验等进行组间比较，症状共现网络通过Cytoscape软件可视化。

结果

临床与实验室特征

OROV感染者平均年龄显著高于DENV感染者（40.2岁 vs 28.5岁，p<0.001）。OROV患者更频繁报告严重头痛（43% vs 16%）、关节痛（76% vs 27%）、眼球后痛（67% vs 37%）及皮疹（35% vs 14%），且皮疹分布更广泛（累及头、躯干及四肢）。肝功能检测显示，OROV患者的丙氨酸氨基转移酶（ALT）水平显著高于DENV患者（47 U/L vs 27 U/L，p<0.001），提示可能存在亚临床肝损伤。

PRNT将OROV检测的灵敏度提高了45%。尿液RT-PCR的阳性率较低（20%），且仅在与血清检测结果一致的样本中呈阳性。

病毒基因分型

对11株OROV分离株进行全基因组测序，系统发育分析显示，2024年马瑙斯疫情毒株与2009–2022年巴西本地流行株高度同源，属于同一进化支，表明疫情由本地持续传播的病毒株引起，未发现新发重组事件。

免疫标志物分析

OROV感染急性期（D1）显著上调CCL11、CXCL10、IFN-γ、IL-1RA和IL-10水平，至恢复期（D28）逐渐下降，而IL-5在恢复期升高。DENV感染则表现为急性期IL-1RA、IL-10、CXCL10和CCL2升高，恢复期G-CSF和CCL3上升。CXCL10在DENV恢复期的水平高于OROV。

讨论

本研究首次在大型现场疫情中系统比较了OROV与DENV的临床-免疫特征。OROV感染者的症状强度（如头痛、关节痛）及免疫应答模式（如CCL11、IFN-γ急性期高表达）与DENV存在显著差异，这些差异可能源于病毒特异性致病机制。OROV感染者ALT轻度升高提示肝细胞炎症反应，与动物模型研究一致。

基因组分析证实本次疫情由本地流行株引发，其高传播性可能与病毒进化适应性增强有关。PRNT与RT-PCR联合使用显著提高了诊断灵敏度，尤其在病毒载量较低或恢复期患者中更具优势。

研究的局限性在于未纳入重症病例，未来需扩大样本以全面评估疾病严重度相关的生物标志物。

结论

OROV与DENV的临床症状重叠度高，在共流行地区需采用综合征鉴别诊断策略。联合分子与血清学检测可优化诊断准确性。细胞因子谱（如CCL11、CXCL10、IL-5）和临床症状特征（头痛强度、皮疹分布）有望成为辅助鉴别工具。持续的基因组监测和公共卫生干预对控制OROV地理扩散至关重要。