综述：BET溴结构域抑制在药物发现中的最新进展与策略

　　本综述系统阐述了BET（Bromodomain and Extra-Terminal）蛋白作为表观遗传"阅读器"在基因调控和疾病治疗中的核心作用。文章重点分析了BD1/BD2结构域的选择性抑制策略，指出域选择性抑制剂（如BET-BD1/BD2选择性抑制剂）相比泛BET抑制剂在降低毒性、提升疗效方面的优势，并深入探讨了多靶点抑制剂、PROTAC降解剂等前沿方向，为癌症（如AML、三阴性乳腺癌）和炎症性疾病治疗提供新视角。

　　

BET BrD蛋白的结构与功能

BET家族蛋白通过其溴结构域（BRDs）识别组蛋白乙酰化修饰，招募转录复合物调控基因表达。该家族包含BRD4、BRD3、BRD2和睾丸特异性BRDT四个成员，均具有两个N端串联溴结构域（BD1和BD2）和一个ET结构域。值得注意的是，BRD4和BRDT还含有独特的C端基序（CTM）。虽然BD1和BD2在BET亚型间具有高度序列保守性，但同一蛋白内的两个结构域同源性较低，这种差异导致其对组蛋白乙酰化位点的识别偏好不同：BD1偏好结合H4K5ac/K8ac双乙酰化位点，而BD2能识别更广泛的乙酰化底物，包括H3K4acK9ac、H3K18acK23ac等模式。

结构研究表明，BD1和BD2的ZA和BC环区序列变异是决定结合选择性的关键因素。BRD4 BD1通过Asn¹⁴⁰和Asp¹⁴⁴形成稳定极性口袋，而BD2则依赖Asn⁴²⁹和His⁴³⁷通过"Asp144/His437开关机制"实现选择性结合。几何特征上，BD1具有更深的结合空腔以适应带正电荷配体，BD2则凭借BC环的构象灵活性适应多样化的乙酰化底物。这些结构差异奠定了它们不同的生物学功能：BD1主要参与细胞周期调控，而BD2在炎症反应和应激应答中发挥核心作用。

BET抑制剂的演进历程

基于BET蛋白在癌症和炎症性疾病中的重要作用，其抑制剂开发已成为药物研究的热点领域。早期泛BET抑制剂（如JQ1、I-BET762）虽在临床前研究中显示抗肿瘤潜力，但存在剂量限制性毒性（DLT）和耐药性问题。近年来，域选择性抑制剂成为突破方向：BD2选择性抑制剂（如ABBV-744）在急性髓系白血病（AML）和三阴性乳腺癌模型中显示优异疗效和安全性，而BD1选择性抑制剂（如GSK789）在炎症性疾病中更具潜力。

创新策略还包括双靶点抑制剂和蛋白降解技术。双特异性抑制剂AZD5153能同时结合同一BET成员的BD1和BD2，显著增强抑制效果。PROTAC降解剂（如ARV825）通过招募E3连接酶诱导BET蛋白降解，不仅阻断溴结构域功能，更彻底消除蛋白的支架作用，在耐药性模型中展现突破性疗效。

PROTAC技术的革命性进展

PROTAC技术为BET抑制提供了新维度。与传统抑制剂相比，BET-PROTACs具有事件驱动型药理特性，可实现亚化学计量浓度的蛋白降解，且作用更持久。分子设计中的关键要素包括：BET配体选择（如JQ1、OTX015）、E3连接酶配体（常用VHL或CRBN）以及连接链优化。值得注意的是，基于CRBN的BET-PROTACs如dBET1显示对BRD4的高选择性降解，而基于VHL的MT1则能同时降解BRD2/3/4。

这类分子还展现出独特"钩状效应"：低浓度时高效降解，高浓度时因形成无效三元复合物反而降低效率。最新研究还发现某些BET-PROTACs能诱导免疫原性细胞死亡，通过激活cGAS-STING通路增强抗肿瘤免疫应答，为联合免疫治疗提供新思路。

结论与未来展望

BET靶向治疗正从泛抑制向精准调控转变。域选择性抑制剂通过精细化调控转录程序，显著改善治疗窗口；双靶点策略和PROTAC技术则通过协同作用克服耐药性。未来研究需关注几个关键方向：一是开发具有组织特异性的靶向递送系统，二是探索BET蛋白与非编码RNA的相互作用网络，三是建立基于生物标志物的患者分层策略。同时，需警惕长期蛋白降解可能带来的脱靶效应和耐药机制演变。随着化学蛋白组学等技术的进步，下一代BET therapeutics有望在精准表观遗传治疗领域实现重大突破。