HSP27磷酸化激活介导髓母细胞瘤对CUSP9v3耐药机制及协同治疗策略研究

　　本研究针对髓母细胞瘤对药物重筛方案CUSP9v3的耐药性问题，通过磷酸化蛋白谱分析发现HSP27激活是关键耐药机制。研究人员采用抑制剂联合策略，在2D/3D模型中均证实抑制HSP27可协同增强CUSP9v3的抗肿瘤效果，并揭示其通过诱导凋亡和抑制OXPHOS代谢重编程发挥作用，为临床克服耐药提供了新思路。

　　

在儿童神经系统肿瘤中，髓母细胞瘤（Medulloblastoma）是最常见的恶性脑肿瘤之一，尽管当前的治疗手段包括手术、放疗和化疗在不断进步，但患者预后仍不理想，尤其是复发和耐药问题严重制约着治疗效果。因此，开发新的治疗策略迫在眉睫。药物重筛（drug repurposing）作为一种高效、低成本的药物开发策略，近年来备受关注。CUSP9v3即是一种基于药物重筛理念设计的组合方案，先前研究显示其在体外对髓母细胞瘤模型具有较强的抗肿瘤活性。然而，与许多靶向治疗一样，耐药性的出现限制了其临床应用。识别耐药机制并探索逆转策略，成为当前研究的重点。

在此背景下，研究人员推测CUSP9v3治疗可能引发某些细胞应激反应和信号通路适应性改变，从而导致耐药。为了验证这一假设，他们开展了针对髓母细胞瘤的磷酸化蛋白质组学分析，结果发现热休克蛋白27（HSP27）的磷酸化激活可能是潜在耐药机制。HSP27是细胞应激反应的关键分子，其磷酸化状态与肿瘤细胞存活、抗凋亡及耐药性密切相关。因此，抑制HSP27功能有望逆转CUSP9v3的耐药性，增强治疗效果。

为此，研究团队在《Neuro-Oncology》上发表了一项 preclinical（临床前）研究，系统探讨了HSP27在介导CUSP9v3耐药中的作用，并评估了联合抑制策略的疗效。研究人员采用MTT法检测细胞活力，通过BLISS分析评估药物相互作用性质，使用3D球体模型模拟体内肿瘤生长环境，利用流式细胞术检测细胞凋亡，并通过蛋白质印迹（Western blot）、siRNA敲降实验及细胞能量代谢分析等技术手段，深入探索了分子机制和代谢改变。

研究首先发现，在多种髓母细胞瘤细胞模型中，CUSP9v3处理可诱导HSP27磷酸化水平显著升高，提示HSP27激活可能是肿瘤细胞应对治疗压力的适应性反应。随后，他们在2D培养模型中测试了低剂量CUSP9v3与HSP27抑制剂的联合效果，BLISS分析表明两者之间存在显著的协同抗增殖效应。这种协同作用在3D球体模型中进一步得到验证，联合处理显著抑制了肿瘤球体的生长。

在机制层面， Annexin V/PI染色显示联合治疗可明显增加凋亡细胞比例，表明协同抗肿瘤效应与促进细胞凋亡密切相关。同时，利用siRNA特异性敲降HSP27表达，能够增强CUSP9v3的抗肿瘤效果，从而反向验证了HSP27作为耐药机制的关键作用。此外，细胞外通量分析结果表明，联合治疗抑制了氧化磷酸化（OXPHOS）过程，说明该策略可通过代谢重编程削弱肿瘤细胞能量代谢，进而抑制其增殖和存活。

综上所述，本研究证实了HSP27磷酸化激活是髓母细胞瘤对CUSP9v3产生耐药的重要机制，而联合抑制HSP27则能有效逆转耐药，产生协同抗肿瘤效应。这一发现不仅深化了对耐药机制的理解，而且为临床克服髓母细胞瘤耐药提供了新的联合治疗策略。未来，针对HSP27的抑制剂或类似联合方案有望成为改善患者治疗效果的新方向。