氨氯地平通过抑制MGMT-AKT/GSK3β/β-catenin通路增强替莫唑胺抗胶质母细胞瘤干细胞协同作用

　　本研究针对胶质母细胞瘤(GBM)化疗耐药难题，发现抗高血压药氨氯地平可通过抑制Akt/GSK3β/β-catenin信号轴下调MGMT表达，显著增强替莫唑胺(TMZ)对胶质瘤干细胞(GSCs)的杀伤效果。体内外实验证实该联合策略能抑制肿瘤生长并延长生存期，为临床克服治疗耐药提供了新颖的药物重定位策略。

　　

胶质母细胞瘤（Glioblastoma, GBM）作为最具侵袭性的原发性脑肿瘤，长期以来一直是神经肿瘤领域的治疗难题。其标准治疗方案包括手术切除、放疗联合替莫唑胺（Temozolomide, TMZ）化疗，但患者预后仍然极差，中位生存期仅约15个月。这种治疗困境的核心在于肿瘤内部存在一群特殊的细胞亚群——胶质瘤干细胞（Glioma Stem Cells, GSCs）。这些细胞不仅具有自我更新和分化为各类肿瘤细胞的能力，更可怕的是它们表现出极强的治疗抵抗特性。其中，O⁶-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶（MGMT）的表达是导致TMZ耐药的关键分子机制之一，它能修复TMZ诱导的DNA损伤，使化疗药物失去杀伤效果。因此，寻找能够有效靶向GSCs、并逆转TMZ耐药的新策略，成为改善胶质母细胞瘤患者预后的重大科学挑战。

在这一背景下，药物重定位（drug repurposing）策略展现出独特优势。氨氯地平（Amlodipine）作为一种经典钙通道阻滞剂（CCB），广泛用于高血压治疗，近年来被发现具有抗肿瘤潜力。但该药物是否能够增强TMZ对GSCs的杀伤作用，其具体分子机制如何，尚未有明确研究。为解答这些问题，来自苏州大学附属第二医院的研究团队开展了系统性的探索，相关成果发表在神经肿瘤学权威期刊《Neuro-Oncology》上。

研究人员综合运用了多种关键技术方法：采用患者来源的GSC细胞系进行体外实验，建立颅内原位移植瘤小鼠模型进行体内验证；通过慢病毒转染技术实现MGMT和β-catenin的过表达；采用蛋白质印迹（Western blot）分析关键蛋白表达变化；使用实时定量PCR（qRT-PCR）检测基因转录水平；应用流式细胞术和免疫荧光技术评估细胞毒性和蛋白定位。

研究结果通过多个维度揭示了氨氯地平的协同作用机制：

Amlodipine inhibited tissue remodeling of GSCs

研究发现氨氯地平能够显著抑制GSCs的自我更新能力和肿瘤球形成能力，表明该药物可直接干扰GSCs维持其干细胞特性的微环境重构过程。

Besides, amlodipine enhanced cyto-toxicity of TMZ against GSCs through downregulating MGMT expres-sion both in vitro and in vivo, via down-regulating Akt/GSK3β/b-catenin axis

实验证明氨氯地平与TMZ联用可产生显著协同效应，其机制在于氨氯地平通过抑制Akt/GSK3β/β-catenin信号通路，进而下调MGMT表达。在体内实验中，联合治疗组小鼠的肿瘤生长明显受到抑制，生存期显著延长。

Overexpression of MGMT reversed the synergistic anti-GSCs effects of amlodipine with TMZ

通过基因工程技术过表达MGMT，可完全逆转氨氯地平与TMZ的协同抗肿瘤效果，证实MGMT下调是氨氯地平发挥增敏作用的关键分子事件。

Pharmacological inhibition of GSK-3β with CHIR-99021 or overexpression of B-catenin reversed amlodipine-induced suppression of cell viability, down-regulation ofβ-catenin and MGMT and enhancement of TMZ cytotoxicity against GSCs

使用GSK-3β特异性抑制剂CHIR-99021处理细胞或过表达β-catenin，均可逆转氨氯地平对细胞活力的抑制、对β-catenin和MGMT的下调作用以及对TMZ细胞毒性的增强效应，进一步验证了Akt/GSK3β/β-catenin信号轴在该过程中的核心调控地位。

In vivo studies also dem-onstrated that the synergetic effect of amlodipine with TMZ against GSCs,which was achieved through down-regulatingβ-catenin and MGMT, then retarding growth of GSCs-derived intracranial xenografts, and prolonging survival of tumor bearing mice

体内实验结果表明，氨氯地平与TMZ联合使用可通过下调β-catenin和MGMT表达，有效抑制GSCs来源的颅内移植瘤生长，并显著延长荷瘤小鼠的生存期，从整体动物水平验证了该联合治疗策略的有效性。

研究结论明确指出，氨氯地平通过抑制Akt/GSK3β/β-catenin信号轴进而下调MGMT表达，与TMZ产生协同抗GSCs效应。这一发现不仅揭示了氨氯地平抗肿瘤作用的新机制，更重要的是为克服胶质母细胞瘤TMZ耐药提供了极具临床转化潜力的治疗策略。由于氨氯地平作为已上市药物，其安全性、药代动力学特征和剂量方案均已明确，这种"老药新用"策略有望大大缩短从基础研究到临床应用的转化时间，为改善胶质母细胞瘤患者预后提供新的希望。该研究还为理解钙通道阻滞剂类药物的抗肿瘤机制提供了新的视角，拓展了药物重定位在神经肿瘤领域的应用前景。