慢性乙型肝炎肝脏B细胞亚群异质性新探：单细胞转录组揭示FCRL1+细胞在免疫耐受与激活期的双重角色

　　本文针对慢性乙型肝炎（CHB）患者肝脏B细胞异质性争议，通过重新分析单细胞转录组数据，发现肝脏中存在7个B细胞亚群（包括未被识别的预激活亚群），并证实FCRL1+ B细胞在免疫耐受（IT）和免疫激活（IA）期均显示活化特征，为CHB免疫调控机制提供了新视角。

　　

慢性乙型肝炎（CHB）是全球重要的公共卫生问题，感染者面临肝硬化、肝衰竭甚至肝癌的风险。尽管病毒特异性免疫应答异常是CHB持续感染的核心，但肝脏局部免疫微环境，特别是B细胞的调控作用，仍有许多未知。近期，Li等人通过单细胞转录组学分析了CHB患者不同临床阶段的B细胞，发现肝脏中存在活化FCRL1⁺ B细胞和耗竭型非典型B细胞，并指出它们在免疫激活（IA）和免疫耐受（IT）期的分布差异。然而，由于数据分析方法的差异，B细胞亚群的鉴定和功能阐释仍存在争议。

为此，Salam、Kalinke和Bruhn研究团队在《Hepatology International》发表致编辑信，对同一数据集（Zhang et al, Gut 2023）进行再分析，专注于肝脏定居B细胞，揭示了更高的异质性，并提出了与Li等人不同的结论，为理解CHB中B细胞的作用提供了新的线索。

本研究主要依托于已发表的单细胞RNA测序（scRNA-seq）数据，样本来源于CHB患者不同临床阶段（IT、IA、慢性恢复CR、急性恢复AR）及健康对照（HC）的肝活检CD45⁺免疫细胞。作者采用CellTypist v1.7.1进行免疫细胞注释和B细胞亚群聚类，通过标记基因表达和免疫球蛋白同种型分析鉴定B细胞亚群，并利用基因集富集分析（GSEA）评估功能特征。

肝脏B细胞呈现更高异质性

通过独立分析肝脏数据（未与血液数据整合），研究者发现了7个B细胞亚群：初始B细胞（NBCs）、预激活B细胞1和2、活化B细胞（表达NR4A1、CD69、FOSB和CD83）、生发中心B细胞（GC B cells）、非典型B细胞（atypical B cells）和记忆B细胞（MBCs）。值得注意的是，预激活B细胞亚群在Li等先前研究中未被识别，这可能是由于数据整合和聚类参数差异所致。

FCRL1⁺ B细胞表达未转换同种型且分布于多个幼稚相关亚群

与Li等认为FCRL1⁺细胞为活化亚群且富集于IA期不同，本研究发现FCRL1主要表达于初始B细胞（NBCs）和预激活B细胞（pre-activated BCs 1/2）。这些细胞表达未转换免疫球蛋白同种型（如IGHD），且预激活BCs的IGHD表达低于NBCs、活化标记（如NR4A1、CD83）表达低于活化B细胞，显示其过渡状态特征。

FCRL1⁺亚群在不同临床期无显著富集

summation分析显示，FCRL1⁺ B细胞（包括NBCs、pre-act BCs 1和pre-act BCs 2）在IA期或其他临床组相比健康对照均无显著增多。基因富集分析进一步表明，IA和IT期FCRL1⁺ B细胞均显示B细胞活化相关通路激活，提示该标记可能指示一种活化预备状态，而非特异性限于IA期。

非典型B细胞在IT期增多

与Li等一致，本研究也发现IT期非典型B细胞增多，但不同于Osmani等此前未观察到该现象的报告。作者指出，肝脏B细胞数量少及scRNA-seq高通量丢失率可能导致富集模式检测存在技术局限，需更大样本验证。

本研究通过精细化再分析揭示CHB肝脏B细胞存在更高异质性，识别出预激活B细胞新亚群，并修正了FCRL1⁺ B细胞仅限于免疫激活期的观点——它们在IT期同样显示活化特征。结果强调了数据分析方法对细胞亚群鉴定和功能解释的关键影响，且呼吁未来研究扩大样本量以确认B细胞亚群在CHB中的真实分布与功能。这些发现深化了对CHB免疫病理机制的认知，也为针对B细胞的免疫治疗策略提供了新思路。