靶向抑制DOT1L介导的组蛋白甲基化：橙皮素改善糖尿病视网膜病变及视网膜微血管内皮细胞功能障碍的新机制

　　本研究发现DOT1L介导的组蛋白甲基化在糖尿病视网膜病变（DR）中显著上调，并通过表观遗传调控机制促进脂肪酸合成酶（FASN）和固醇调节元件结合蛋白1（SREBF1）表达，导致视网膜微血管内皮细胞功能障碍。研究首次揭示天然黄酮类化合物橙皮素（Hes）可直接结合DOT1L并抑制其甲基转移酶活性，从而改善高糖诱导的细胞损伤并延缓DR进展，为DR治疗提供了新的靶点和候选化合物。

　　

Section snippets

Cell culture and transfection

人视网膜微血管内皮细胞（RME）购自中乔新舟生物科技有限公司（上海），使用含10%胎牛血清的内皮细胞培养基培养。阴性对照siRNA（siNC）、靶向DOT1L的siRNA（siDOT1L）和靶向FASN的siRNA（siFASN）由吉玛基因（上海）提供，野生型和点突变型DOT1L过表达质粒则通过其他渠道获得。

DOT1L-mediated histone methylation is highly expressed in retina of DR mice and HG-induced RME cells

为阐明DOT1L在DR发病机制中的作用，我们首先检测了糖尿病小鼠视网膜中DOT1L的表达水平。结果显示，在STZ诱导的糖尿病小鼠视网膜中，DOT1L及其相关的组蛋白甲基化修饰显著上调（图1，图1）。RME细胞对视网膜微血管的结构完整和功能维持至关重要，其功能障碍与DR的发生和发展密切相关。

Discussion

本研究揭示了DOT1L在DR发病中的新功能。结果表明，DOT1L通过调控组蛋白甲基化修饰影响FASN和SREBF1的表达，进而导致RME细胞功能障碍。此外，橙皮素（Hes）通过抑制DOT1L介导的组蛋白甲基化，对DR及RME细胞功能障碍发挥保护作用。机制上，Hes通过直接结合DOT1L并抑制其酶活性，调控下游脂代谢相关基因的表观遗传状态。