《Biochemical Pharmacology》：A novel phosphodiesterase 5 inhibitor, CPD1, alleviates liver fibrosis by modulating the Akt/NF-κB pathway to inhibit activated hepatic stellate cells
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肝纤维化治疗新策略：新型PDE5抑制剂CPD1通过激活cGMP/PKG通路抑制HSC活化及胶原沉积，其疗效优于西地那非且机制涉及阻断AKT/NF-κB通路。
冯文斌|杨建勤|雷家秀|李丽梅|单长峰|陈申杰|张宗蒙|赵正刚|周素珍|赵艾伦·子健|穆云平|李芳红
中国广东省工业大学生物医学与药学科学院，广州
摘要
肝纤维化是一种进行性疾病，其特征是细胞外基质异常积聚，目前尚无有效的抗纤维化药物。最新研究表明，抑制磷酸二酯酶5（PDE5）对纤维化疾病具有显著益处，这表明PDE5抑制剂可能是有效的抗纤维化药物。本研究旨在开发一种新的PDE5抑制剂——钾盐晶体形式B（CPD1），其水溶性远高于西地那非。我们评估了CPD1抑制肝星形细胞（HSCs）激活的效果，并研究了其作用机制。在四氯化碳诱导的肝纤维化模型中研究了CPD1的治疗效果，通过环鸟苷单磷酸（cGMP）依赖性蛋白激酶（PKG1）或Akt抑制剂以及在LX-2细胞中过表达PKG1来探讨其抗纤维化机制。正如预期的那样，PDE5A在人类和小鼠的纤维化肝组织中以及由转化生长因子-β1（TGFβ1）诱导的LX-2细胞中的表达显著升高。在体内实验中，CPD1以剂量依赖的方式降低了血清转氨酶水平，减轻了肝损伤，减少了胶原蛋白沉积，并抑制了HSCs的激活。此外，CPD1在较低剂量下比西地那非更有效。在体外实验中，CPD1抑制了TGFβ1诱导的LX-2细胞激活，并减少了纤维化标志蛋白和基因的表达。值得注意的是，在给予PKG1抑制剂后，CPD1的抗纤维化效果完全消失。从机制上讲，CPD1的干预有效对抗了TGFβ1诱导的p-IκBα和p-P65的升高。本研究证明，CPD1通过激活cGMP/PKG通路来缓解肝纤维化，进而抑制AKT/NF-κB通路。因此，它可以被视为一种潜在的治疗药物，值得进一步研究以用于治疗肝纤维化。
章节摘录
引言
肝纤维化是一种复杂的病理过程，由多种慢性肝脏损伤引起，导致细胞外基质（ECM）成分过度积聚。这种情况可能发展为肝硬化和肝衰竭[1,2]。导致肝纤维化的病因因素包括慢性病毒感染、过量饮酒、代谢性疾病（如非酒精性脂肪肝病（NAFLD）和自身免疫性肝病[3,4]。目前，
CPD1的合成
CPD1（ET32637-37-P1）由吴氏AppTec（中国天津）定制合成，纯度超过99%，并通过分析证书（COA）得到确认。CPD1的详细合成路线和理化特性已在专利文献中记录[34]。Sif（139755-83-2）购自吴氏AppTec（中国天津）。
动物模型
C57BL/6J雄性小鼠，年龄6–8周，体重20 ± 2克，购自广东省医学实验动物中心CPD1抑制PDE5表达并促进NO/cGMP通路
最初，我们从GEO数据库获取了一组数据并进行了重新分析。结果显示，肝纤维化患者的PDE5A mRNA表达水平显著升高（图1A）。与此发现一致的是，在TGFβ1刺激下，LX-2细胞中的PDE5A表达显著增加，而CPD1（200 μM）显著下调了PDE5A的表达（图1B）。在CCl4
讨论
肝纤维化是慢性肝脏损伤的病理后果，继续对全球健康构成重大负担，目前有效的治疗选择很少。PDE5抑制剂作为一种有前景的抗纤维化药物出现；然而，它们的作用机制和相对疗效仍需进一步探索[36]。在本研究中，我们探讨了一种新型PDE5抑制剂CPD1在肝纤维化临床前模型中的治疗潜力。我们的研究结果表明，CPD1
伦理批准声明
动物实验程序获得了广东省药科大学（中国广东；批准编号SPF2017010）的批准。
作者贡献声明
冯文斌： 数据可视化、项目管理、数据整理。杨建勤： 数据可视化、方法学。雷家秀： 数据可视化、方法学。李丽梅： 数据整理。单长峰： 软件、方法学。陈申杰： 构思。张宗蒙： 验证。赵正刚： 验证。周素珍： 验证。赵艾伦·子健： 资源获取、研究、资金筹措。穆云平： 写作——审阅与编辑、初稿撰写、监督、资源管理、方法学、研究。李芳红：资助
广州市科学技术计划，资助/奖励编号：2023B03J1291；中国国家重点科技项目，资助/奖励编号：2023ZD0506904；国家自然科学基金，资助/奖励编号：82100064。利益冲突声明
作者声明以下财务利益/个人关系可能被视为潜在的利益冲突：本文的数据与一项专利（CN201910505948.5）相关，该专利归深圳汉辉制药技术有限公司所有。
致谢
广州市科学技术计划（2023B03J1291）、中国国家重点科技项目（2023ZD0506904）和国家自然科学基金（82100064）支持了这项工作。
