从胃肠道活检样本中采用巨细胞病毒（CMV）定性聚合酶链反应技术诊断CMV相关胃肠道疾病的实用性：一项为期10年的回顾性研究

《Journal of Clinical Virology》：Utility of cytomegalovirus (CMV) qualitative polymerase chain reaction from gastrointestinal biopsies in diagnosis of CMV gastrointestinal disease: a 10-year retrospective study

　　CMV胃肠疾病诊断中组织PCR与病理学对比研究纳入533例患者635次内镜活检，结果显示组织PCR灵敏度100%，但特异性仅71.7%（调整Ct阈值后升至82.7%）。多变量分析表明高CMV DNAemia（>1000 IU/mL）和器官移植（SOT）显著增加患病风险，而造血干细胞移植（HSCT）降低风险。建议组织PCR仅用于高度疑似病例以排除CMV胃肠疾病。

　　CMV（巨细胞病毒）是一种广泛存在的疱疹病毒，通常在免疫功能正常的人群中表现为无症状感染，但在免疫功能受损的患者中可能导致严重的组织侵袭性疾病。近年来，随着器官移植、造血干细胞移植（HSCT）以及免疫抑制治疗的广泛应用，CMV感染在这些患者中的发生率显著增加，其在胃肠道（GI）中的表现尤其值得关注。CMV胃肠道疾病可以表现为结肠炎、食管炎、胃炎、溃疡或回肠炎等，这些疾病在临床实践中往往需要结合多种诊断手段进行综合判断。

传统上，CMV胃肠道疾病的诊断主要依赖于内镜活检组织的组织病理学检查。然而，随着分子诊断技术的发展，组织PCR作为一种更敏感的检测方法，逐渐被引入临床实践。组织PCR能够检测组织样本中的CMV核酸，相较于传统的组织病理学检查，具有更高的灵敏度。然而，其特异性仍存在一定的局限性，这使得在临床实践中如何合理使用组织PCR成为一个重要议题。为了进一步探讨组织PCR在CMV胃肠道疾病诊断中的实际应用价值，一项涵盖10年数据的回顾性研究在加拿大温哥华大学的附属医院进行，比较了组织PCR与组织病理学检查在诊断CMV胃肠道疾病中的表现。

研究纳入了从2014年2月至2024年1月期间，在温哥华总医院（Vancouver General Hospital）接受上消化道或下消化道内镜检查的患者。最终共有533名患者接受了635次内镜检查，其中41例组织病理学检查确认为CMV胃肠道疾病，涉及37名患者。组织PCR在所有组织病理学确认的病例中均显示出100%的灵敏度，但在特异性方面表现较弱，仅为71.7%。当排除了循环阈值（Ct）大于32的样本后，组织PCR的特异性有所提升，达到82.7%，但灵敏度则下降至87.8%。这一结果表明，虽然组织PCR在检测CMV胃肠道疾病方面具有很高的灵敏度，但其特异性仍较低，容易出现假阳性结果，这可能与病毒脱落而非实际感染有关。

此外，研究还探讨了血浆CMV DNA载量与胃肠道疾病之间的关系。结果显示，血浆CMV DNA载量超过1000 IU/mL时，患者的胃肠道疾病风险显著增加，而HSCT（造血干细胞移植）则与较低的疾病风险相关。这提示我们在评估CMV胃肠道疾病时，应综合考虑患者的免疫状态和血浆病毒载量等指标。尽管组织PCR在诊断方面表现出色，但其在临床决策中的作用仍需谨慎对待，特别是在缺乏组织病理学证据的情况下，组织PCR阳性结果可能并不一定代表真正的疾病存在。

在实际操作中，组织PCR的样本处理方式和检测方法也对结果产生影响。在本研究中，组织样本在内镜检查时被新鲜采集并使用蛋白酶K和十二烷基硫酸钠进行处理，随后通过MagNA Pure 24系统提取DNA，并使用Light Cycler 480 II进行实时PCR检测。这种方法虽然能够提高检测的准确性，但在实际应用中仍面临一些挑战，例如样本的采集和处理方式可能会影响检测结果，且不同实验室之间在检测标准和阈值设定上的差异也限制了其普遍适用性。

值得注意的是，CMV组织PCR与组织病理学检查之间存在一定的互补关系。尽管组织PCR在检测CMV感染方面具有更高的灵敏度，但其特异性较低，这使得在没有组织病理学支持的情况下，组织PCR的阳性结果可能无法明确诊断。在本研究中，对于组织PCR阳性但组织病理学检查未发现CMV病变的患者，其结果被归类为“可能”感染，而并非“确诊”感染。这种分类方法在一定程度上反映了组织PCR在临床诊断中的局限性，尤其是在需要明确诊断的情况下。

此外，研究还发现，CMV组织PCR的阳性结果与血浆CMV DNA载量之间存在正相关关系。这提示我们，虽然组织PCR可以作为诊断工具，但其结果仍需结合血浆病毒载量等其他指标进行综合评估。在某些情况下，如HSCT患者，尽管组织PCR结果阳性，但其实际患病率较低，这可能与这些患者中更频繁的检测行为有关，从而降低了实际患病的先验概率。

综上所述，这项研究为CMV胃肠道疾病的诊断提供了新的视角。尽管组织PCR在检测CMV感染方面具有较高的灵敏度，但其特异性较低，可能不足以单独用于诊断。因此，组织PCR更适合用于在高先验概率的患者中排除CMV胃肠道疾病，或在组织病理学检查结果不确定时作为辅助手段。未来的研究需要进一步探讨如何优化组织PCR的检测方法和阈值设定，以提高其在临床诊断中的准确性和实用性。同时，还需关注不同患者群体之间的差异，例如在器官移植和自身免疫疾病患者中，CMV感染的风险和表现可能有所不同，这需要更多的临床数据支持。此外，组织PCR的临床意义仍需进一步验证，特别是在结合患者治疗反应和临床转归方面，以明确其在疾病管理中的实际价值。