《Molecular Neurobiology》：Melatonin Attenuates the Inflammatory Response of Astrocyte Following Ischemia Stroke through SIRT1/NF-κΒ Signaling Pathway
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为破解再灌注后炎症级联加剧难题，团队聚焦星形胶质细胞，证实预防性褪黑素通过上调SIRT1去乙酰化NF-κB p65，显著缩小tMCAO/R大鼠梗死灶并改善神经功能，为IS提供可转化的抗炎-神经保护双效方案。
脑卒中犹如“大脑停电”，每延迟1分钟就有190万神经元凋亡。尽管溶栓可快速“恢复供电”，却常因再灌注风暴触发二次损伤——星形胶质细胞（astrocyte）被异常激活，释放TNF-α、IL-1β等“炎症弹幕”，扩大梗死区。既往研究多聚焦小胶质细胞，而占据胶质细胞90%的astrocyte在缺血-再灌注（I/R）中的角色仍像“黑箱”。更棘手的是，临床尚缺靶向astrocyte的抗炎神经保护剂。褪黑素（melatonin）作为“夜间激素”虽被证实可减轻小鼠脑梗死，但其对astrocyte炎症开关的作用及分子靶点仍是空白。
为回答“褪黑素能否及如何关闭astrocyte炎症开关”，Hao Zhuang等构建tMCAO/R大鼠与OGD/R原代astrocyte双模型，系统评估预防性褪黑素的抗炎-神经保护效应。研究发现：褪黑素提前一周腹腔注射（50 mg/kg）可显著提升SIRT1表达，借助其去乙酰化酶活性抑制NF-κB p65乙酰化与核转位，阻断炎症基因转录，使梗死体积缩小42%，mNSS评分下降38%；体外100 μM褪黑素即可在12 h再灌注点将astrocyte的iNOS、COX2蛋白水平分别下调56%与48%，并减少ROS生成。该论文2025年11月19日在线发表于《Molecular Neurobiology》，首次揭示“褪黑素-SIRT1-p65去乙酰化”轴是astrocyte炎症刹车的关键机制，为缺血性脑卒中（ischemic stroke, IS）提供可临床转化的联合干预新靶点。
关键技术：tMCAO/R模型联合激光散斑脑血流监测；原代astrocyte OGD/R模型；SIRT1过表达与siRNA转染；Co-IP验证SIRT1-p65相互作用；分子对接预测结合位点；免疫荧光共定位；Western blot/ELISA检测炎症蛋白与细胞因子；DCFH-DA探针测ROS。
研究结果
褪黑素减轻tMCAO/R模型脑损伤：TTC染色显示褪黑素组梗死体积显著缩小，H&E示空泡化比率下降，mNSS评分降低。
褪黑素抑制astrocyte炎症激活：免疫荧光与Western blot示iNOS、COX2及TNF-α、IL-1β、IL-6表达均下调。
褪黑素恢复SIRT1表达：在体与体外I/R后SIRT1蛋白水平下降，褪黑素呈剂量依赖性回升。
褪黑素减少ROS生成：下调NOX4表达，DCFH-DA荧光减弱。
SIRT1过表达模拟褪黑素效应：OE-SIRT1降低iNOS/COX2及p65乙酰化水平；siSIRT1逆转褪黑素抗炎作用。
SIRT1与p65直接互作：分子对接与Co-IP证实两者结合，OGD/R后结合减弱、乙酰化p65增多，褪黑素可恢复结合并降低乙酰化。
结论与讨论
研究证实“褪黑素→SIRT1↑→p65去乙酰化→NF-κB失活”是astrocyte炎症刹车的核心轴心，补充了IS再灌注损伤中astrocyte-centric机制空白，为开发靶向SIRT1的卒中预防-治疗联合方案奠定实验基础。未来需验证血脑屏障完整性及长期功能修复，以推动褪黑素衍生物进入临床转化。
