《Journal of Developmental Origins of Health and Disease》：Activation of the heat shock response by human milk-derived extracellular vesicles in neonates with perinatal high-fat diet exposure
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围产期高脂饮食（mHFD）可持久激活子代HPA轴并诱发代谢-神经发育异常。Storm等利用人乳胞外囊icles（MEVs）干预mHFD新生大鼠，发现MEVs显著上调雌鼠前额叶HSF1并下调Hsp70-Hsp90负调控复合物，提示其延长热休克反应（HSR）并赋予细胞保护。该研究首次揭示MEVs通过性别依赖的HSR机制对抗围产期营养应激，为开发母乳来源纳米干预策略奠定理论基础。
“吃得太油，宝宝大脑会怎样？”这是无数新手妈妈在微信群里焦虑讨论的话题。大量动物实验已证实，孕期和哺乳期高脂饮食就像在大脑里点燃一把“慢火”，激活下丘脑-垂体-肾上腺轴（HPA轴），让糖皮质激素居高不下，神经炎症悄悄蔓延，成年后焦虑、肥胖、代谢综合征纷至沓来。然而母乳向来被视为“天然盾牌”，其中纳米级的乳源胞外囊泡（MEVs）能穿越血脑屏障，却鲜有人知道它们能否为被高脂“点燃”的大脑降温。Storm JA等正是带着这一疑问，在加拿大温尼伯大学开展了迄今首个“MEVs×HSR×性别”三方对话实验，结果于2025年在线发表于《Journal of Developmental Origins of Health and Disease》。
研究人员首先建立围产期高脂暴露模型：雌鼠孕前4周至哺乳期全程食用含60% kcal脂肪的mHFD，对照组为蔗糖匹配的10% kcal低脂饲料。分娩后第4天起，雌雄仔鼠分别经口灌胃人乳MEVs（1×101?颗粒/克体重）或PBS，每日2次，持续至第11天——正值大鼠“应激低反应期”峰值。随后采集肝脏、下丘脑、前额叶皮层，用RT-qPCR与Western blot量化热休克反应核心分子HSF1、Hsp70、Hsp90、Hsp40/DNAJB1的表达。实验设计采用2（饮食）×2（处理）×2（性别）四重复，每窝2雌2雄，共32只仔鼠，样本量符合Arifin资源方程。
关键技术方法：①围产期mHFD与对照饮食干预；②人口腔捐献母乳经超速离心+过滤分离MEVs，纳米颗粒跟踪分析与电镜鉴定；③PND4–11口服灌胃；④RT-qPCR检测HSR转录本；⑤Coomassie归一化Western blot检测HSR蛋白；⑥重复测量GLM与Tukey HSD统计。
研究结果如下：
母鼠代谢与繁殖表现
mHFD母鼠在孕前两周热量摄入显著升高，但体重、交配成功率、仔数及哺乳期体重变化与对照无差异，提示模型聚焦于饮食成分而非肥胖本身。
仔鼠生长与脂肪沉积
mHFD仔鼠PND11体重、腹膜后脂肪与胃内乳凝块重量均显著高于对照，Lee指数无差异，证实高脂暴露主要增加脂肪量而非体型比例，且MEVs对体重无干预效应。
肝脏HSR存在性别偏向
雌鼠MEVs显著上调HSF1、HSPA1A、DNAJB1转录，而雄鼠无变化；蛋白层面仅Hsp40呈性别相反趋势：mHFD降低雄鼠Hsp40却升高雌鼠Hsp40，提示雌仔肝更易启动HSR。
下丘脑以饮食效应为主
mHFD升高雄鼠HSF1与Hsp90转录但降低HSPA1A，雌鼠仅HSF1转录升高；蛋白水平mHFD升高雄鼠HSF1与Hsp40，降低Hsp70与Hsp40，MEVs仅轻微下调雄鼠HSP90AA1转录，显示该脑区对高脂更敏感而MEVs调控有限。
前额叶皮层MEVs最显效
转录层面未见显著差异；蛋白层面，MEVs在雌雄均上调HSF1，同时下调Hsp70、Hsp90、Hsp40，尤以雌鼠HSF1增幅最大。由于Hsp70-Hsp90复合物为HSF1负调控因子，其下调意味着MEVs可能延长HSF1介导的促生存转录程序，为前额叶提供持续细胞保护。
结论与讨论
该研究首次揭示：①MEVs可穿越血脑屏障，在HPA轴关键节点调控HSR；②雌仔对MEVs更敏感，呈现性别特异保护；③在前额叶皮层，MEVs通过“上调HSF1+下调负调控子”模式延长热休克反应，为抵御围产期高脂诱导的蛋白毒性与神经炎症提供新思路。未来解析MEVs内何种miRNA或蛋白 cargo 驱动HSF1开关，将有望把母乳纳米囊泡开发成早期干预神经发育障碍的“天然药物”。
