SVEP1低表达通过Jag2/Notch1/Hes5通路驱动肝内胆管癌表型转换与转移的机制研究

《Cell Death & Disease》：Low SVEP1 in intrahepatic cholangiocarcinoma mediates phenotype switching-driven metastasis by Jag2/Notch1/Hes5

　　本研究针对肝内胆管癌（ICC）高转移性和化疗耐药性等临床难题，首次揭示细胞外基质蛋白SVEP1低表达通过破坏SVEP1/整合素α9β1结合，激活Jag2/Notch1/Hes5信号轴，诱导上皮-间质转化（EMT）表型转换，进而促进ICC增殖、迁移和肺转移。该发现为ICC提供了新的预后生物标志物和潜在治疗靶点，发表于《Cell Death and Disease》。

　　

肝内胆管癌（ICC）是起源于肝内胆管上皮的恶性肿瘤，占所有胆管癌的10%-15%。近年来其全球发病率显著上升，但由于早期诊断困难、易发生远处转移以及化疗耐药等问题，患者术后5年生存率极低。近半数患者术后一年内出现复发，凸显了探索ICC转移机制的紧迫性。肿瘤细胞的可塑性，特别是上皮-间质转化（EMT）过程，被认为是驱动肿瘤侵袭和转移的关键环节，但其在ICC中的具体调控机制尚不明确。细胞外基质（ECM）蛋白在细胞-微环境相互作用中扮演重要角色，其中多结构域蛋白SVEP1在胚胎发育和细胞黏附中的作用已被报道，但其在ICC进展中的功能仍是未知领域。

为揭示ICC转移新机制，研究团队通过高通量RNA测序筛选差异表达基因，结合公共数据库和临床样本分析，首次发现SVEP1在ICC组织中显著低表达，且与淋巴结转移、卫星结节形成、高Ki-67指数等不良预后特征密切相关。通过体内外功能实验、患者来源类器官（PDO）和异种移植（PDX）模型，研究人员系统阐明了SVEP1低表达通过分子机制促进ICC恶性进展的全过程。该研究发表于《Cell Death and Disease》2025年第16卷。

研究关键技术包括：基于113例ICC组织芯片的免疫组化分析、TCGA/GEO数据库生物信息学验证、慢病毒介导的基因敲低、Transwell迁移/侵袭实验、蛋白质印迹（WB）与共免疫沉淀（Co-IP）、患者来源类器官培养及小鼠肺转移模型构建。

SVEP1鉴定及其对ICC临床预后的预测价值

通过对比高低复发风险ICC患者的RNA测序数据，研究发现细胞黏附分子通路显著富集，并筛选出SVEP1在高复发组中明显下调。TCGA和GEO数据库验证显示SVEP1在胆管癌组织中普遍低表达，且低表达患者无病生存期（DFS）和总生存期（OS）更短。

SVEP1表达模式与临床病理特征的相关性

免疫组化检测证实SVEP1在ICC肿瘤细胞质和ECM中表达降低，其低表达是DFS和OS的独立风险因素，且与淋巴结转移、卫星结节及Ki-67高表达显著相关。

SVEP1下调促进ICC细胞增殖、迁移和侵袭

体外实验表明，敲低SVEP1可增强ICC细胞（RBE和HCCC-9810）的增殖能力、划痕愈合速度、化学趋化迁移和基质侵袭能力，基因富集分析提示这些变化与细胞运动性相关。

SVEP1缺失诱导ICC的EMT表型转换

GSEA分析显示SVEP1低表达与间质-上皮转化（MET）负相关。敲低SVEP1后，上皮标志物（E-钙黏蛋白、Ovol1/2）下调，间质标志物（波形蛋白、N-钙黏蛋白、ZEB1/2）上调，临床样本中SVEP1与E-钙黏蛋白表达呈正相关，与波形蛋白负相关。

SVEP1在体内抑制ICC进展和转移

PDO实验证实外源SVEP1蛋白可恢复上皮表型；PDX模型显示SVEP1敲低促进肿瘤生长；尾静脉注射模型表明SVEP1缺失显著增加肺转移结节数量。

SVEP1缺失激活Jag2/Notch1/Hes5信号轴

RNA测序富集分析提示Notch1通路激活。SVEP1敲低细胞中Jag2、Notch1、Hes5表达上调，Dll4下调。Notch抑制剂（crenigacestat）可逆转EMT表型和恶性行为。

SVEP1/整合素α₉β₁结合减少通过Notch1通路促进恶性转化

Co-IP验证SVEP1与整合素α₉β₁直接结合。使用整合素抗体竞争性阻断结合或外源添加SVEP1重组蛋白的实验表明，SVEP1/整合素α₉β₁结合减少是激活Jag2/Notch1/Hes5轴并诱导EMT的关键机制。

本研究首次揭示SVEP1在ICC中作为肿瘤抑制因子，通过调控整合素α₉β₁-Notch1信号轴维持上皮表型。SVEP1低表达导致Jag2/Notch1/Hes5通路异常激活，驱动EMT表型转换，进而促进ICC转移和复发。

该研究不仅阐明了SVEP1在ICC中的新功能，还为临床提供了潜在的预后生物标志物和治疗靶点。针对SVEP1-整合素α₉β₁-Notch1轴的干预策略，可能为抑制ICC转移提供新思路，具有重要的转化医学价值。