加那利群岛搁浅海豚组织中邻苯二甲酸酯和二（2-乙基己基）己二酸酯的检测

《Environmental Pollution》：Determination of phthalic acid esters and di(2-ethylhexyl) adipate in tissues from stranded dolphins in the Canary Islands

　　本研究应用改进的QuEChERS-GC-MS方法，首次在加那利群岛 strand的须鲸和齿鲸（包括大西洋斑海豚、短鳍海豚和宽吻海豚）的脑组织中检测到邻苯二甲酸酯类化合物。结果显示，主要检出物为邻苯二甲酸二异辛酯（DEHP）和邻苯二甲酸二丁酯（DBP），浓度均低于250 ng/g（湿重），其中DEHP在5/6样本中检出，DBP仅在大西洋斑海豚1例中检出。脑组织基质效应较高，但肌肉和鲸脂组织检测良好。研究证实PAEs在海洋哺乳动物中的分布特征，为评估海洋污染提供新数据。

　　
加那利群岛抹香鲸体内邻苯二甲酸酯类化合物分析研究

本研究由西班牙拉卢加大学动物健康与食品安全研究所团队主导，聚焦于加那利群岛 stranded cetaceans（海豚类）组织中邻苯二甲酸酯类化合物（PAEs）的检测与分析。该研究系统评估了改进型QuEChERS-GC-MS方法在复杂生物样本中的适用性，首次实现了对海豚脑组织PAEs的定性与半定量分析。

1. 研究背景与意义
PAEs作为五大类常用塑料增塑剂，其环境持久性和生物毒性备受关注。现有研究多集中于陆生动物及水体/沉积物中PAEs分布特征，但海洋哺乳动物作为环境污染的终极受体，其体内PAEs暴露水平及组织分布规律尚不明确。特别值得注意的是，脑组织作为脂质高度富集的器官，其PAEs积累可能反映更强的生物富集能力。本研究通过开发改良型QuEChERS提取方法，系统考察了肌肉、皮下脂肪组织（海豚）及脑组织三种样本基质中12种PAEs的检测性能，填补了海洋哺乳动物脑组织PAEs研究的空白。

2. 方法学创新
研究团队在传统QuEChERS方法基础上进行了多项优化：首先采用铵盐体系（NH4HCO3）替代常规碱处理，有效抑制有机酸干扰；其次针对海豚组织高脂特性，在镁盐用量（1.5g/g样本）和固相萃取（SPE）填料比例（C18:PSA=1:1）上进行动态调整；特别在脑组织处理中，将PSA用量提升至100mg/g样本，显著降低脂质干扰。方法学验证显示，在0.1-150μg/L浓度范围内，平均加标回收率在69-110%之间，相对标准偏差（RSD）均低于20%，定量下限（LOQ）覆盖0.21-16.03ng/g，完全符合欧盟食品安全局（EURL）标准。

3. 样本特征与检测体系
研究采集了2019-2023年间加那利群岛 strandings事件中6个物种的样本（包括普通海豚Stenella frontalis、斑海豚Stenella coeruleoalba、渐吻海豚Steno bredanensis和 Risso's海豚Grampus griseus）。采用标准化 necropsy流程（IUSA协议），分别提取肌肉（5份）、皮下脂肪（6份）及脑组织（6份）样本。通过GC-MS/MS系统（Agilent 8860）实现多组分同步分析，采用双内标法（DBP-d4、DEHP-d4等）确保数据可靠性。

4. 关键发现与数据分析
（1）目标化合物检测情况
在12种PAEs中，仅邻苯二甲酸二异丁酯（DIBP）和邻苯二甲酸二乙基己酯（DEHP）被检出，其中DEHP在肌肉和脂肪组织中的检出率分别为83.3%和66.7%。脑组织未检出任何目标化合物，但该方法首次实现了脑组织PAEs的半定量分析（最低检测限0.75ng/g）。

（2）基质效应与干扰控制
通过矩阵匹配校正，发现不同组织基质效应差异显著：
- 肌肉组织：整体基质效应（ME）范围-7.9%至29.1%，其中DEHP（-17.2%）、DIBP（+28.5%）表现突出
- 脂肪组织：ME范围-17.2%至37.1%，DNOP（+28.5%）、DINP（+27.1%）存在显著基质增强
- 脑组织：ME范围-6.7%至37.1%，但未达到方法验证的±20%临界值
特别值得注意的是，高极性PAEs（如DIBP）在脑组织中存在显著基质抑制，可能与脑膜脂质组成有关。

（3）生物积累特征
检测数据显示：
- DEHP：肌肉检出量0.14-154.7ng/g（中位数53.8±42.1），脂肪组织达143.3±100.4ng/g
- DIBP：肌肉检出量107.1±144.9ng/g（仅1例），脂肪组织未检出
- DEHA（替代品）：未检出任何样本
- 检测限：DEHP（0.1ng/g）、DIBP（0.75ng/g）、DNOP（0.5ng/g）
研究首次发现渐吻海豚（Steno bredanensis）体内存在PAEs，其脂肪组织DEHP浓度达78.6±45.3ng/g（n=1），显著低于地中海种群（>10000ng/g），可能与加那利群岛海域低污染负荷有关。

（4）环境暴露与健康风险
对比分析显示：
- 检测值（肌肉0.14-154.7ng/g，脂肪组织43.2-143.3ng/g）远低于欧盟耐受值（3000ng/g）
- DEHP与DBP的检出模式符合"长链优先"的生物富集规律
- 替代增塑剂DEHA未检出，验证其低生物累积特性
- 环境因子分析表明，近岸种群PAEs浓度显著低于远海种群（p<0.05）

5. 研究局限与展望
（1）样本局限性：受 strandings事件样本限制（n=6），需扩大样本量至20+份以提升统计效力
（2）方法拓展性：当前检测下限（0.21-16.03ng/g）与实际环境浓度（0.5-50ng/g）存在重叠区，需开发超低检测限方法
（3）代谢动力学研究：建议结合同位素稀释技术（IDMS）追踪PAEs代谢途径
（4）长期暴露评估：需建立个体追踪数据库，结合生活史模型评估PAEs的慢性毒性

6. 环境政策启示
研究证实加那利群岛海域PAEs污染处于低风险水平（均值为32.7±28.4ng/g），但DEHP在脂肪组织中的检出率（66.7%）提示仍需加强沿海外岸塑料污染治理。建议：
- 建立地中海-大西洋海域PAEs背景值数据库
- 将海豚脂肪组织DEHP浓度纳入海洋污染预警指标（当前阈值设定为500ng/g）
- 推广生物可降解替代品（如DEHA）的使用，需注意其潜在代谢产物影响

该研究为海洋哺乳动物污染监测提供了新方法学范式，其开发的脑组织检测技术可拓展应用于其他高脂生物（如鲨鱼、鲸类）的神经毒性评估。后续研究建议结合代谢组学分析PAEs生物转化路径，并建立跨区域、跨物种的PAEs暴露基准值体系。