埃及肉鸡群中新发卡氏住白细胞虫感染的临床病理学与分子诊断新见解

《Scientific Reports》：New insights into recently emerged Leucocytozoon caulleri infection in Egyptian broiler flocks through clinical, pathological, hematological, and molecular investigation

　　本研究针对埃及肉鸡群中近期出现的出血综合征，首次通过临床、病理、血液学及分子技术确诊了卡氏住白细胞虫（L. caulleryi）感染。研究人员在24个开放式养殖场（18万只鸡）中系统开展了病原鉴定，揭示了该虫体在多个器官中形成特征性巨型裂殖体并引发贫血、广泛出血及坏死，实时荧光定量PCR（real-time PCR）结果进一步验证了感染。该研究为兽医和养殖户提供了关键诊断依据，强调了在媒介活跃季节加强生物安全的重要性。

　　

在埃及规模庞大的家禽养殖业中，一种神秘的出血性疾病近年来悄然出现，引起了兽医和养殖者的高度警觉。患鸡表现为精神沉郁、食欲减退、体重下降和严重贫血，死亡率虽不高（0.5%-2%），但剖检可见肌肉、内脏器官广泛的点状出血和腹腔积血，症状极易与传染性法氏囊病（IBD）、鸡传染性贫血病毒（CIAV）、新城疫（ND）等高致病性禽流感（HPAI）相混淆，给准确诊断和有效防控带来了巨大挑战。这一问题的核心在于，埃及地处尼罗河三角洲，夏季高温高湿，开放式养殖场毗邻水稻田和水源，为传播病原的蠓（Culicoides）等媒介昆虫提供了理想的孳生环境。尽管此前埃及其他省份已有住白细胞虫感染的零星报道，但在埃尔-夏基亚省（El-Sharkia governorate）的暴发尚属首次，且其病理特征需要与上述病毒性出血性疾病进行精确区分。为此，来自扎加齐格大学（Zagazig University）的研究团队开展了一项系统研究，旨在通过多学科方法揭示此次疫情的元凶，研究成果已发表于《Scientific Reports》。

为精准揭示病因，研究团队在2023年至2024年夏季，对埃尔-夏基亚省32个出现可疑症状的肉鸡群进行了筛查，最终严格筛选出24个符合标准的养殖场（共计18万只鸡）纳入研究。这些鸡群均饲养于靠近水源和稻田的开放式禽舍，且临床表现为典型的出血综合征。研究综合运用了临床观察和病理剖检、血液涂片和新型细胞块（Cell block）技术进行病原形态学鉴定、组织病理学（Histopathology）检查观察器官病变，并采用实时荧光定量PCR（real-time PCR）进行分子确认。

临床检查和死后剖检结果

对患病鸡群的观察发现，其主要临床表现为不同程度的嗜睡、抑郁、食欲废绝、体重减轻、羽毛蓬乱，以及鸡冠和肉髯苍白。特征性病变包括眼部周围皮下出血和水肿，胫部和趾部出现多发性至融合性皮下圆形出血性结节。

剖检可见胸肌、腿肌和皮下脂肪中嵌有多发的针尖大小出血点。肾脏严重肿胀、出血，腹腔内有大量积血。此外，肝包膜下出血、肌胃溃疡、胰腺明显点状出血等也是常见病变。这些广泛的出血性病变与俗称“曼谷出血病”的住白细胞虫病特征高度吻合。

血液学检查结果

吉姆萨（Giemsa）染色的血液涂片检查揭示了病原体的存在。研究人员观察到了林卡氏住白细胞虫的多种发育阶段。大配子体（Macrogametocytes）呈深嗜碱性，体积较大；小配子体（Microgametocytes）则呈嗜酸性或粉红色。成熟的配子体会导致宿主红细胞形态改变和细胞核移位，而未成熟的虫体阶段对宿主细胞形态影响较小。

细胞块检查结果

本研究首次将细胞块技术应用于林卡氏住白细胞虫的诊断。该技术将血液样本浓缩后像组织一样进行石蜡包埋和切片，从而可以观察更大体积的血液样本，提高了对虫体检出的敏感性。检查结果清晰显示了血液中游离的成熟虫体、形态未受明显影响的未成熟虫体，以及许多溶血的红细胞和棕色的含铁血黄素色素。

组织病理学检查结果

组织病理学检查是确诊住白细胞虫病的“金标准”。在肾脏、肝脏、肺、肌肉、心脏、肠道、胰腺、脾脏等多个器官中均发现了特征性的、厚壁的巨型裂殖体（megaloschizonts），其内充满深染、圆形的嗜碱性裂殖子（merozoites）。

这些病变周围伴有弥漫性出血、组织坏死和以淋巴细胞、巨噬细胞为主的单核细胞浸润。特别是在肌胃黏膜发现了溃疡，在皮肤真皮层发现了干酪样坏死，这些发现为理解该病的病理过程提供了新的视角。

实时荧光定量PCR检测

分子检测为诊断提供了最终的确凿证据。针对林卡氏住白细胞虫细胞色素b基因的特异性实时荧光定量PCR检测显示，所有24个农场的样本均呈阳性，扩增曲线和熔解曲线分析结果清晰，循环阈值（C_T）较早（20-35个循环），表明组织中病原体载量较高。

统计分析

数据显示，鸡群日龄与死亡率呈显著负相关（r = -0.836, p < 0.01），表明日龄越小的鸡越易感，死亡率越高。虽然2024年的平均死亡率（1.206%）略高于2023年（1.033%），但统计上无显著差异。事后检验（post-hoc analysis）指出样本量较小导致统计效力不足，这与此病为新发且具有明显季节性（仅在夏末秋初暴发）有关。

综上所述，本研究通过多维度证据，首次在埃及埃尔-夏基亚省的肉鸡群中确诊了林卡氏住白细胞虫感染。研究不仅系统描述了该病的临床病理特征，还引入了细胞块技术作为血液涂片的有益补充，提高了诊断能力。更重要的是，研究成功将林卡氏住白细胞虫感染与其它引起出血综合征的病毒性疾病区分开来，为当地兽医和养殖户提供了准确的诊断依据。研究发现，该病的发生与媒介蠓的栖息地（近水、稻田）和季节（夏末）密切相关，且幼龄鸡更易受害。这警示家禽从业者，在特定季节和地理环境下，需对住白细胞虫病保持高度警惕，并通过加强生物安全措施（如防虫网、环境管理）来阻断传播途径。该研究填补了埃及该地区家禽住白细胞虫病知识的空白，对保障家禽健康、减少经济损失具有重要意义，也为未来开展更大范围的流行病学监测、探索有效防控策略奠定了基础。