一种口服多颗粒制剂，载有肽类成分，可作为治疗由产肠毒素大肠杆菌引起的腹泻的新疗法

《Journal of Drug Delivery Science and Technology》：Oral peptide-loaded multiparticulate formulation as a novel therapy against Enterotoxigenic Escherichia coli induced diarrhea

　　制备纳米硒负载果胶微胶囊口腔递送系统（NMF）可有效治疗肠毒素性大肠杆菌（ETEC）感染，其体外抗菌活性较游离尼素提高2倍（MIC=125 μg/mL），体内实验证实能显著降低腹泻评分、减少细菌载量并修复肠道组织损伤。

　　
近年来，由产肠毒素大肠杆菌（ETEC）引发的旅行者腹泻已成为全球公共卫生领域的重要挑战。世界卫生组织数据显示，每年全球约有2.2亿人感染ETEC，其中儿童和免疫力低下群体面临更高风险。尽管当前治疗手段包括口服补液盐和抗生素（如氟喹诺酮类），但抗生素耐药性（AMR）的快速发展严重威胁了疗效。研究团队注意到，天然抗菌肽如乳铁蛋白（Nisin）具有广谱抗菌活性且不易产生耐药性，但天然存在的抗菌肽存在口服不稳定、生物利用度低等问题。为此，研究者创新性地构建了 multiparticulate 口服制剂（NMF），通过三重递送系统实现靶向治疗。

在制剂设计方面，研究团队采用生物可降解的植物来源多糖（低聚果糖）作为载体，通过静电吸附形成微胶囊结构。核心层负载纳米硒颗粒（SeNPs），其独特结构可同时发挥抗菌载体和抗氧化功能。实验数据显示，这种多层递送系统成功将Nisin的封装效率提升至87.68%，显著高于传统微胶囊技术。制剂的粒径分布（2-4微米）和球状形貌（SEM图像证实）使其能够顺利通过口腔和胃部，最终定位于肠道靶向给药。

体外抗菌实验表明，NMF对ETEC H10407菌株的最低抑菌浓度（MIC）为125微克/毫升，较游离Nisin降低60%浓度。这种增强效应源于三重协同机制：首先，纳米硒颗粒的抗氧化特性保护了Nisin在胃肠道中的活性；其次，微胶囊结构延缓了药物释放，使抗菌活性成分在肠道靶向释放；最后，多层递送系统规避了胃酸破坏，确保药物完整抵达肠道病灶。

体内实验部分采用大鼠模型验证了制剂的疗效。实验数据显示，NMF组的大鼠腹泻指数较对照组降低76.5%，肠道绒毛修复速度提升2.3倍。病理学分析发现，NMF组肠道组织的细胞凋亡率（通过AO/PI染色检测）达到对照组的3.2倍，且细菌载量降低4个数量级。特别值得注意的是，该制剂在抑制ETEC的同时未对肠道正常菌群造成显著影响，这得益于微胶囊的精准控释特性。

从作用机制分析，NMF通过多模式协同作用实现高效杀菌。流式细胞术检测显示，处理后的细菌细胞膜完整性破坏率高达92%，其作用路径包括：①纳米硒颗粒的金属螯合作用破坏细菌细胞膜；②Nisin通过形成孔洞效应破坏细胞膜结构；③微胶囊载体促进抗菌肽在肠道局部的高浓度释放。FESEM电镜图像直观展示了NMF作用后细菌细胞壁的典型裂解特征。

该研究在多个方面实现了突破性进展。首先，首次将纳米硒与生物可降解微胶囊技术结合，解决了抗菌肽口服稳定性问题。其次，开发的 multiparticulate 制剂具有三重递送优势：外层微胶囊保护药物通过胃部，中间纳米颗粒负载实现缓释，内层活性成分精准靶向。第三，通过引入硒元素形成"纳米载药-金属催化"协同系统，使抗菌效率提升近2倍。这些创新为克服AMR提供了新思路。

在应用前景方面，该制剂展现出显著的临床优势。与传统抗生素相比，NMF无需担心耐药性问题，且对儿童、孕妇等敏感人群更安全。制备工艺采用经典的静电自组装技术，无需复杂设备，生产成本可控。稳定性测试显示，在pH 2-9环境及40℃条件下，NMF的活性保持率超过85%，具备商业化潜力。

不过，研究也面临若干挑战需要后续探索。首先，纳米硒颗粒的长期生物安全性仍需验证，建议开展3年以上毒理学研究。其次，制剂的肠道吸收效率仍有提升空间，可通过表面修饰技术增强脂质体膜渗透性。此外，关于不同ETEC亚型对NMF敏感性的差异，以及与其他肠道菌群（如双歧杆菌）的互作机制，都是值得深入研究的方向。

这项研究为开发新型口服抗菌制剂提供了重要参考。其核心价值在于建立"生物可降解载体-纳米载体-活性成分"三级递送系统，通过物理屏障保护、金属催化增强和靶向释放三重机制提升疗效。未来可拓展至其他肠道致病菌（如沙门氏菌）的治疗，并探索与其他益生菌的协同应用，为构建基于肠道微生态的精准治疗体系奠定基础。