双氢青蒿素通过调控miR-200b-BMI-1/VEGF-A轴抑制卵巢癌干细胞特性及血管生成的新机制

《EXPERIMENTAL AND MOLECULAR MEDICINE》：Dihydroartemisinin inhibits metastatic potential and cancer stemness by modulating the miR-200b–BMI-1/VEGF-A axis in ovarian cancer

　　本研究针对卵巢癌(OC)易转移和化疗耐药的临床难题，揭示了双氢青蒿素(DHA)通过上调miR-200b，进而抑制BMI-1和VEGF-A/VEGFR2表达，显著降低癌症干细胞(CSCs)特性、血管生成拟态(VM)和肿瘤新生血管形成。DHA与卡铂(CBP)联用产生协同效应，有效抑制肿瘤生长和腹膜播散。临床数据分析证实BMI-1与VEGF-A双阳性预示不良预后，为克服卵巢癌化疗耐药提供了新策略。

　　

卵巢癌是妇科恶性肿瘤中死亡率最高的癌种，尽管铂类化疗初期有效，但多数患者因获得性耐药导致复发转移。癌症干细胞(CSCs)被认为是耐药和复发的根源，其通过BMI-1等蛋白维持自我更新能力，并分泌血管内皮生长因子(VEGF-A)促进肿瘤血管生成和血管生成拟态(VM)，形成促转移微环境。双氢青蒿素(DHA)作为抗疟疾药物青蒿素的衍生物，已被证明具有抗癌活性，但其对卵巢癌CSCs和肿瘤血管生成的调控机制尚不明确。

本研究通过球体形成实验、ALDH1活性检测、血管生成拟态分析等技术，发现DHA可显著抑制卵巢癌细胞SKOV3和原代卵巢癌细胞的干细胞特性，包括球体形成能力、ALDH1阳性细胞比例和自我更新潜能。此外，DHA还抑制了VM形成、细胞迁移和侵袭。在动物实验中，DHA处理的小鼠肿瘤体积显著减小。

机制上，DHA处理显著下调CSCs标志物BMI-1的表达，而卡铂(CBP)处理则无此效果。BMI-1敲低实验证实其调控CSCs特性。同时，DHA抑制VEGF-A的表达和分泌，进而抑制内皮细胞(ECs)的管腔形成和迁移。研究发现DHA通过上调miR-200b表达，间接抑制BMI-1和VEGF-A/VEGFR2表达。miR-200b过实验验证其可抑制CSCs特性和血管生成。

在腹腔移植瘤模型中，DHA与CBP联合治疗显著抑制腹水形成、腹膜种植和肿瘤生长，且不影响小鼠生理指标。临床样本分析显示，BMI-1和VEGF-A双阳性患者无进展生存期(PFS)更差。

本研究主要采用球体形成实验富集CSCs、流式细胞术检测ALDH1活性、体外血管生成和迁移实验、蛋白质印迹(Western blot)和实时荧光定量PCR(qPCR)分析基因表达、免疫组织化学(IHC)染色、腹腔移植瘤模型，以及临床卵巢癌组织样本队列分析。

DHA inhibits CSC characteristics and malignant behavior in OC

DHA处理显著抑制SKOV3细胞和原代卵巢癌细胞的球体形成、ALDH1阳性细胞比例和自我更新能力，同时抑制VM形成、细胞迁移和侵袭。体内实验证实DHA减小肿瘤体积。

DHA inhibits CSC-like traits by attenuating BMI-1 in OC cells

DHA下调BMI-1表达，而CBP无此作用。BMI-1在卵巢癌组织中高表达，其敲低抑制球体形成。

DHA inhibits VEGF-A-mediated tumor neovascularization in OC cells

DHA抑制VEGF-A表达和分泌，进而抑制内皮细胞管腔形成和迁移。VEGF-A在卵巢癌组织中高表达。

DHA-mediated miR-200b modulates CSC characteristics by regulating BMI-1 expression in OC cells

DHA上调miR-200b表达，其与BMI-1和VEGF-A表达负相关。miR-200b过表达抑制CSCs特性。

DHA-mediated miR-200b modulates tumor neovascularization by impeding VEGF-A/VEGFR2-mediated microenvironmental crosstalk between OC cells and ECs

DHA通过上调miR-200b抑制VEGFR2表达，进而抑制VEGF-A诱导的内皮细胞管腔形成和迁移。

Combined treatment with DHA and CBP impedes OC growth and peritoneal seeding in a mouse model of intraperitoneal OC

DHA与CBP联用协同抑制腹水形成、腹膜种植和肿瘤生长，且安全性良好。

High expression of BMI-1 and VEGF-A is associated with poor prognosis in human OCs

临床数据分析显示BMI-1和VEGF-A双阳性是PFS的独立不良预后因素。

研究结论表明，DHA通过调控miR-200b-BMI-1/VEGF-A轴，同时靶向CSCs和肿瘤血管生成，克服卵巢癌化疗耐药。其低毒、廉价的特点具有临床转化潜力，为卵巢癌治疗提供了新策略。