门静脉与外周血循环肿瘤细胞及癌小体亚型在胰腺癌诊断与预后评估中的价值

《npj Precision Oncology》：Circulating tumor cell and oncosome subtypes in portal and peripheral venous circulations may be used for diagnosis and prognostication of pancreatic cancer

　　本研究针对胰腺癌早期诊断难、预后预测手段有限的临床挑战，通过内镜超声引导下同步采集门静脉血（PoVB）与外周血（PB），系统分析了循环肿瘤细胞（CTC）和癌小体（Oncosomes）的亚型分布特征。结果显示，PoVB中CTC（尤其间质亚型）与1年生存率显著相关（p=0.0083），而PB癌小体可独立预测不良预后（p=0.0014）。该研究为胰腺癌液体活检提供了双循环互补模型，凸显了门静脉采样在精准肿瘤学中的转化潜力。

　　

胰腺癌被称为“癌王”，其五年生存率不足10%，主要原因是早期诊断困难且易发生肝转移。目前临床依赖影像学与组织活检，但敏感度有限，无法动态监测肿瘤演进。液体活检技术通过检测血液中的循环肿瘤细胞（CTC）和细胞外囊泡等生物标志物，为无创诊断带来希望。然而，传统外周血（PB）CTC检测在胰腺癌中灵敏度低，因大部分CTC可能被肝脏截留。为此，美国南加州大学Peter Kuhn团队联合西达赛奈医疗中心，探索了门静脉血（PoVB）这一更接近肿瘤原发灶的血液样本的价值，相关成果发表于《npj Precision Oncology》。

研究团队利用内镜超声（EUS）引导下穿刺技术，对39例胰腺导管腺癌（PDAC）患者同步采集PoVB与PB样本，结合76例健康人对照，采用高内涵单细胞分析技术（HDSCA）进行多标志物荧光染色与人工智能辅助稀有事件鉴定。通过非参数统计、生存分析与机器学习模型，系统评估了CTC与癌小体在不同循环腔室中的分布及临床意义。

结果

1. 稀有事件在PDAC患者中显著升高

与健康对照相比，PDAC患者PB中总稀有事件（细胞+癌小体）、上皮CTC（Epi.CTC）、间质CTC（Mes.CTC）及CK⁺癌小体均显著增多（p=4.71×10^?10），证实液体活检在胰腺癌检测中的敏感性。

2. 门静脉血富集CTC而癌小体双腔室共存

PoVB中CTC数量显著高于PB，尤其Epi.CTC和D|CK|CD表型细胞（p<10^?6），提示CTC从胰腺释放后多数滞留于门静脉系统，未能进入体循环。相反，癌小体在PB与PoVB中检出率无显著差异，表明其易通过肝滤过，可作为系统性疾病标志物。

3. 诊断与预后价值分腔室互补

PB中癌小体对癌症诊断准确率最高（逻辑回归模型95.65%），而PoVB中Epi.CTC诊断准确率达100%。生存分析显示，PoVB中Mes.CTC与1年生存率正相关（p=0.0083），PB中CK|V⁺癌小体与D|V|CD表型细胞则提示不良预后（p=0.0014）。

4. 肝滤过效应揭示转移机制

据门静脉血流量估算，每日约有8亿CTC流经肝脏，但PB中CTC极少，支持“肝捕获”假说。这为胰腺癌高发肝转移提供了生物学解释，并提示肝微环境在肿瘤播散中的关键作用。

结论与讨论

本研究首次系统比较了PoVB与PB在胰腺癌液体活检中的差异，提出“双循环互补模型”：PB癌小体适于早期筛查，PoVB CTC利于预后分层。该策略突破传统PB检测的灵敏度瓶颈，为EUS引导下精准采样提供临床路径。未来需扩大样本量验证Mes.CTC的预后价值，并探索癌小体携带的肿瘤特异性分子 cargo（如DNA、代谢物）在疾病监测中的作用。此外，结合肝功能指标与CTC动态清除模型，可能进一步优化转移风险预测。

技术方法概要

研究纳入39例PDAC患者（75份PB、46份PoVB）及76例健康对照血样，使用HDSCA平台进行无富集多荧光标记（DAPI/CK/VIM/CD45/CD31），通过OCULAR算法与人工复核鉴定8类细胞与4类癌小体。统计分析采用Wilcoxon检验、Spearman相关性及KM生存曲线，机器学习模型包括逻辑回归与随机森林。