评估一种侧向流动免疫层析检测方法在检测HIV阴性但患有肺隐球菌病的患者支气管肺泡灌洗液中的隐球菌抗原的效果

《Microbiology Spectrum》：Evaluation of a lateral flow immunochromatographic assay for detecting cryptococcal antigens in bronchoalveolar lavage fluid from HIV-negative patients with pulmonary cryptococcosis

　　该研究评估了非HIV患者肺曲霉病（PC）中BALF和血清CrAg-LFA的诊断性能，结果显示单独检测时血清敏感性90.5%与BALF 88.1%接近，但联合检测将灵敏度提升至100%。研究证实BALF检测对血清阴性但临床高度怀疑病例具有重要补充价值，且特异性均达99.6%。研究还发现低血清抗原滴度（≤1:20）与BALF假阴性相关，提示需结合影像学特征进行诊断优化。

　　
本研究针对非HIV人群肺曲霉病（PC）的诊断效能展开系统性评估，重点比较支气管肺泡灌洗液（BALF）与血清中曲霉抗原快速检测法（CrAg-LFA）的协同作用。研究纳入2013至2024年间北京某三甲医院514例临床疑似PC患者，最终确诊42例。通过CT影像学、病理学及宏基因组测序（mNGS）建立金标准诊断体系，结合多维度生物标志物检测，揭示了BALF检测在早期诊断中的独特价值。

研究首先验证了CrAg-LFA在BALF与血清中的独立诊断价值。数据显示，BALF检测灵敏度为88.1%，特异性99.6%；血清检测灵敏度为90.5%，特异性同为99.6%。值得注意的是，当联合两种样本检测结果时，总灵敏度提升至100%，阴性预测值达100%，同时保持99.1%的特异性。这一发现突破了传统认知，证实BALF检测可作为血清检测的可靠补充。

在样本分析层面，研究发现：38例（90.5%）确诊患者存在阳性血清样本，4例（9.5%）为阴性结果。BALF检测虽灵敏度略低于血清，但通过联合检测可完全覆盖所有阳性病例。特别值得关注的是，5例BALF弱阳性（Weakly Positive）患者中，4例同时存在血清1:5稀释阳性结果，提示抗原浓度梯度差异可能影响检测结果。进一步分析显示，单侧肺病变患者中，80%存在血清抗原浓度≤1:20的关联特征，且该群体更易出现BALF假阴性（4例）与弱阳性（4例）交叉现象。

影像学特征与检测结果存在显著关联。CT显示弥漫性炎症阴影（35.7%）的患者中，87%呈现临床症状，而结节型病变（19.0%）患者中75%为无症状状态。血清检测中，无症状患者82%存在低抗原浓度（≤1:40），而症状组仅52%呈现类似特征。这种差异可能与感染阶段和病灶分布有关——早期局部病灶可能尚未引发系统性免疫应答，导致血清抗原浓度较低。

技术验证部分显示，血清样本存在2例假阳性（肺癌患者），BALF样本存在2例假阳性（类风湿性肺结节或隐球菌性肺炎）。这提示检测需结合临床背景判断，对于持续阳性但影像学无特征的患者，建议进行mNGS检测以排除其他病原体干扰。研究特别指出，当血清检测结果为阴性但存在典型影像学表现时，BALF检测可将诊断准确率提升至100%。

临床应用价值方面，研究证实了 BALF检测在以下场景的优势：①支气管镜检查指征明确的疑似病例；②血清检测持续阴性但影像学特征典型者；③免疫抑制患者（本研究17例中16例无禽类暴露史）的早期筛查。对于已接受治疗的病例，联合检测可显著降低治疗中断风险，研究显示NPV达100%。

流行病学特征显示，本组病例中50%为双侧病变，单侧病变多见于左肺（4:17）。基础疾病中心血管系统（50%）和内分泌系统（50%）患病率最高，可能与免疫调节异常相关。值得注意的是，35.7%患者存在禽类接触史，但该因素与免疫抑制状态呈显著负相关（P=0.001），提示可能存在不同的致病机制。

在技术改进方面，研究建议优化BALF采集方案：①确保灌洗液回收率＞30%（本研究通过分次灌洗100ml总量实现）；②避免低温保存导致的抗原降解；③联合检测时建议先进行血清筛查，若结果阴性且影像学特征典型，立即实施BALF采样检测。对于弱阳性样本（≤1:5），推荐进行抗原定量检测以区分早期感染与免疫应答迟缓。

研究局限性包括单中心回顾性设计（样本量514例中确诊仅42例）和未纳入CSF检测的完整数据。未来需开展多中心前瞻性研究，特别是针对隐匿性肺曲霉病（影像学异常但无明确感染征象）的生物学标志物探索。建议将BALF CrAg-LFA纳入高风险人群的常规筛查项目，并建立血清与BALF抗原浓度的动态监测体系。

该研究为非HIV人群肺曲霉病的诊断提供了重要参考，证实了支气管镜检查中BALF检测的临床价值。特别在基层医疗机构，血清检测阴性但影像学特征典型患者， BALF检测可作为有效补充手段，显著提高早期诊断率。未来需结合分子检测技术（如mNGS）与免疫组化分析，建立更精准的鉴别诊断体系。