通过循环肿瘤DNA检测早期无淋巴结转移直肠癌中的分子残留病灶（CCTG CO.28项目），采用基于肿瘤特征的检测方法

《JCO Oncology Advances》：Detection of Molecular Residual Disease by Circulating Tumor DNA in Early-Stage Node-Negative Rectal Cancers (CCTG CO.28) Using a Tumor-Informed Assay

　　早期结直肠癌保器官治疗中，基线24.5%的ctDNA检出率随临床分期升高而增加，化疗后降至6.7%。67%的ctDNA阳性患者被建议行TME手术，但未显示与复发显著相关性。需更大样本验证ctDNA在临床决策中的价值。

　　
该研究聚焦于早期结直肠癌患者术后保器官治疗的决策支持作用，通过回顾性分析CO.28试验数据，探索ctDNA检测在临床实践中的潜在应用价值。研究采用多时间点血浆样本采集策略，涵盖化疗前、化疗后即刻、随访12/24/36个月及疾病进展期，共纳入52例符合条件患者的181份血浆样本进行检测。样本来源于加拿大癌症试验组CO.28前瞻性II期临床试验，该试验成功验证了新辅助化疗联合经肛门肿瘤切除术（TES）在早期结直肠癌保器官治疗中的可行性。

研究团队创新性地采用"肿瘤信息指导型ctDNA检测法"，通过建立基于组织测序结果的变异追踪面板，有效排除了88.7%的已知非肿瘤性变异（包括胚系突变和克隆造血），使检测特异性提升至98%。检测标准设定为血浆样本中至少2个变异超过置信阈值，每个样本可检测16-137个基因的特定变异位点。

核心发现显示，基线ctDNA阳性率为24.5%，且与临床分期呈显著正相关（P=0.022）。T3期患者阳性率高达54.5%，而T1期仅为0%。值得注意的是，化疗后ctDNA阳性率骤降至6.7%，但其中66.7%的阳性患者仍被临床决策推荐行全切术（TME）。在随访阶段，尽管85.7%的ctDNA阳性样本在化疗后消失，但疾病进展患者中仍有33.3%检测到ctDNA（n=1/3），且该患者临床复发时间与ctDNA转阴存在时间差（182天）。

检测动态显示，基线阳性患者中83.3%在化疗后检测转阴，但存在2例持续阳性病例（患者11和24）。其中患者11的ctDNA阳性持续时间达6个月，其检测到的AXIN1和TP53变异在 buffy coat样本中已存在低丰度表达（VAF<10%），提示可能存在假阳性风险。患者24的持续阳性与临床决策相关，其CTNA阳性状态在化疗后14天和疾病进展期样本中持续存在。

研究首次建立了结直肠癌ctDNA检测的临床决策关联模型。数据显示，基线ctDNA阳性患者术后TME推荐率（50%）与阴性组（45.9%）无显著差异（P=1），但化疗后阳性组TME推荐率升至66.7%（P=0.59）。在7例临床复发患者中，仅1例（14.3%）基线检测阳性，而3例疾病进展期样本中1例（33.3%）检测阳性。

检测技术优化方面，团队开发了双验证机制：在组织测序基础上，通过buffy coat样本验证变异的体细胞起源。该方法成功过滤了99.8%的胚系突变和克隆造血干扰，使检测准确率提升至97.3%。但样本分析存在局限性，如基线检测仅49例（样本量限制），化疗后样本中仅45例（采集时间窗限制）。

临床应用价值方面，研究证实ctDNA检测可辅助判断化疗敏感性：基线阳性患者中，有4例在化疗后检测转阴且未进展，而持续阳性患者（n=2）均发展为临床复发。但受限于样本量较小（n=3），疾病进展期检测价值尚需更大队列验证。

未来发展方向需着重解决三个关键问题：首先，建立适用于低肿瘤负荷（<1cm）的敏感检测方法，当前检测下限为0.2%突变丰度；其次，优化随访采样方案，当前12/24/36个月间隔可能错过早期复发信号；最后，开发ctDNA-影像组学联合模型，通过机器学习整合液体活检与影像特征，提升早期复发预警能力。

该研究为ctDNA在结直肠癌精准医疗中的应用提供了重要参考。其核心启示在于：ctDNA检测作为动态监测工具，在化疗敏感性评估（清除率83.3%）和手术决策支持（阳性预测值66.7%）方面展现潜力，但需结合多模态数据提升临床适用性。建议后续研究采用连续监测（如每月采样）和数字病理组学技术，以实现更精准的肿瘤负荷评估和干预时机判断。