越南脓毒症患者免疫细胞亚群与细胞因子谱的分子分析：揭示预后新靶点

《Clinical and Experimental Medicine》：Molecular analysis of immune cell subsets and cytokine profiles in septic Vietnamese patients

　　本研究针对脓毒症免疫病理机制不清、缺乏人群特异性数据的问题，系统开展了越南脓毒症患者免疫细胞亚群（B细胞、T细胞、NK细胞）与细胞因子谱的分子特征研究。结果发现存活者B细胞比例更高，而非存活者T/NK细胞活化标志物（CD69、GITR）显著升高；CD8+CD45RA+CD197-T细胞减少和IL-6升高是死亡风险关键指标。该研究首次揭示了越南人群脓毒症特异性免疫标志物，为精准免疫治疗提供新依据。

　　

脓毒症是全球健康的重大威胁，每年导致约1100万人死亡，占全球死亡人数的近五分之一。世界卫生组织（WHO）已将其列为全球健康优先事项，但这一疾病在医疗资源有限的中低收入国家（LMICs）尤其致命。脓毒症的病理核心是机体对感染的免疫反应严重失调，表现为过度炎症与免疫抑制的复杂交替，最终导致多器官功能衰竭。尽管危重症护理不断进步，脓毒症在重症监护室（ICU）中仍是导致死亡的主因，幸存者还常面临长期后遗症。当前研究的瓶颈在于，脓毒症的免疫发病机制——尤其在 underrepresented 人群（如亚洲患者）中——尚未明确。既往研究多基于西方人群，忽视了遗传背景、病原体流行病学差异对免疫反应的影响。因此，在越南人群中开展脓毒症免疫特征的精准解析，对开发针对性诊疗策略具有紧迫意义。

发表于《Clinical and Experimental Medicine》的这项研究，由越南VinUniversity联合军事中央医院108等机构完成，团队通过流式细胞术（如CFSE增殖实验、NK细胞杀伤活性检测）和多重液相芯片技术（ProcartaPlex?），对30例越南脓毒症患者及40名健康对照的外周血样本进行系统性分析。关键技术方法包括：利用表面标志物（CD3、CD4、CD8、CD19、CD56等）分选免疫细胞亚群；通过均值荧光强度（MFI）量化NK细胞活化受体（NKG2D、DNAM-1等）；采用CFSE稀释法评估T细胞增殖；并以K562细胞为靶标测定NK细胞毒性。所有患者均按Sepsis-3标准诊断，样本来源于2021–2022年河内医疗中心的前瞻性队列。

患者特征

研究纳入的30例脓毒症患者中，非存活者17例（56.7%），存活者13例（43.3%）。两组在年龄、性别、住院时间、病原体类型（革兰阳性/阴性菌）及器官功能障碍分布上均无显著差异，表明后续免疫参数差异独立于基线特征。

淋巴细胞群变化

脓毒症患者淋巴细胞、T细胞（CD3⁺）、辅助T细胞（CD4⁺）、细胞毒性T细胞（CD8⁺）、B细胞（CD19⁺）和NK细胞（CD56⁺）的绝对计数均显著下降（p < 0.001），但CD4/CD8比值升高（2.5 vs. 1.5, p = 0.039），提示CD8⁺T细胞耗竭更严重。

非存活者T细胞比例更高（63.4% vs. 49.0%, p < 0.001），而存活者B细胞比例显著升高（33.7% vs. 22.1%, p = 0.012），表明B细胞可能通过体液免疫保护作用改善预后。

B细胞亚群分析

脓毒症患者总B细胞比例升高（15.9% vs. 7.7%, p < 0.001），但幼稚B细胞（CD27^-CD21⁺）和记忆B细胞（CD27⁺CD21⁺）显著减少，同时耗竭型CD21_lowB细胞比例激增（63.2% vs. 23.3%, p < 0.001）。浆细胞和类别转换B细胞增加，反映抗体应答活跃，但记忆池萎缩可能削弱长期免疫防御。

T细胞亚群与活化状态

CD8⁺初始T细胞（CD45RA⁺CD62L⁺）减少，而效应记忆T细胞（CD45RA⁺CD62L^-）增加。非存活者中CD8⁺CD45RA⁺CD197^-T细胞比例显著低于存活者（19.8% vs. 35.1%, p = 0.039），提示该亚群缺失与死亡风险相关。

T细胞和NK细胞的活化标志物CD25、CD69、GITR在脓毒症中普遍升高，但非存活者NK细胞CD69、GITR及T细胞GITR表达更高，暗示过度活化可能导致免疫衰竭。

NK细胞功能受损

NK细胞毒性受体NKG2D、DNAM-1的MFI显著降低（p < 0.05），而NKp44表达升高。体外杀伤实验显示，脓毒症患者NK细胞对K562细胞的毒性在各效靶比下均显著减弱（p < 0.05），表明功能瘫痪。

细胞因子风暴与免疫失衡

27种细胞因子检测显示，脓毒症患者促炎因子（G-CSF、IL-6、IL-8、MCP-1等）和抗炎因子（IL-1RA、IL-10）均显著升高。非存活者IL-6水平远高于存活者（183.7 pg/mL vs. 55.1 pg/mL, p = 0.034），而TNF-α无组间差异，凸显IL-6为关键预后指标。

研究结论与意义

本研究首次全面描绘越南脓毒症患者的免疫图谱，揭示三大核心发现：

1. 1.
   B细胞耗竭与预后相关：存活者B细胞比例更高，而非存活者呈现CD21_lowB细胞增多及记忆B细胞枯竭，提示体液免疫崩溃是死亡驱动因素之一。
2. 2.
   T/NK细胞活化双刃剑：尽管T细胞增殖指数升高，但效应记忆亚群失衡及NK细胞毒性受体下调导致功能瘫痪；非存活者中GITR、CD69的高表达标志免疫过度活化终末阶段。
3. 3.
   IL-6与CD8⁺CD45RA⁺CD197^-T细胞作为新型生物标志物：二者联合可精准预测死亡风险，且TNF-α的无关性凸显人群特异性免疫特征。

这些结果不仅深化了对脓毒症免疫病理的理解，更为越南及类似LMICs人群的免疫治疗提供新靶点（如抗IL-6疗法、GITR激动剂）。未来需扩大样本量并开展纵向研究，以捕获免疫动态演变轨迹，推动脓毒症的精准免疫干预策略。