成纤维细胞生长因子信号驱动小细胞肺癌转移的新机制：聚焦YAP1亚型与FGF/R轴

《British Journal of Cancer》：Fibroblast growth factor signals drive the metastatic behavior in small cell lung cancer

　　本研究针对小细胞肺癌(SCLC)早期转移的临床难题，通过3D球体形成、斑马鱼异种移植模型及蛋白质组学分析，发现YAP1主导亚型中FGF/R信号轴是驱动侵袭性生长的关键分子机制。抑制FGFR可显著降低体外萌芽和体内转移，为靶向SCLC转移提供了新的治疗策略。

　　

小细胞肺癌（SCLC）是一种具有高度侵袭性的肺部恶性肿瘤，约占肺癌病例的15%。其最致命的特征在于早期发生远处转移，约三分之二的患者在确诊时已出现转移病灶。尽管化疗和免疫治疗取得一定进展，但由于转移导致的治疗抵抗和复发，SCLC患者的五年生存率仍极低。近年来，基于转录因子的分子分型（ASCL1、NEUROD1、POU2F3和YAP1）为理解SCLC异质性提供了新视角，尤其是YAP1亚型被认为与间质特征和不良预后相关。然而，驱动SCLC转移的具体分子机制尚不明确，限制了有效治疗策略的开发。

为揭示SCLC转移的驱动因素，研究人员整合了多学科实验技术。他们首先利用13株人SCLC细胞系建立3D球体模型，通过胶原基质中的萌芽实验评估侵袭能力；采用蛋白质组学分析筛选差异表达蛋白；使用生长因子阵列检测分泌谱；通过qPCR和Western blot验证关键分子表达；并借助斑马鱼胚胎异种移植模型（移植细胞来源于患者源性细胞系）在体评估肿瘤细胞的迁移和侵袭行为。此外，研究还通过特异性抑制剂（如erdafitinib、nintedanib）和重组因子（如FGF2）进行功能验证。

SCLC细胞在体外表现出不同的球体形成和侵袭性萌芽能力

通过3D培养体系，8株细胞能形成紧凑球体，其中4株（H196、H372、H1341、HLHE）在胶原中表现出明显的侵袭性萌芽，被归类为“萌芽型”。这些细胞均属于YAP1主导亚型，其平均萌芽长度随时间显著增加，而非萌芽型细胞（如H524、GLC4）则保持球体完整。

萌芽型细胞系在共培养和斑马鱼模型中更具侵袭性

在与内皮细胞共培养的CCID（环形化学驱避诱导缺陷）实验中，萌芽型细胞能更有效地破坏血管和淋巴管内皮细胞单层。在斑马鱼模型中，注射萌芽型细胞的幼虫尾部区域肿瘤细胞数量显著多于非萌芽型，且通过荧光通道掩模分析证实了肿瘤细胞的血管外侵袭。

萌芽型和非萌芽型细胞的蛋白质表达存在差异

蛋白质组学分析显示，萌芽型细胞高表达ITGA3、VIM、ACTN1/4、EGFR等间质和粘附相关蛋白，而非萌芽型细胞则富集神经内分泌标志物（如DLL3、SYP）。生长因子阵列进一步揭示，萌芽型细胞分泌更高水平的HGF、FGF2/4/6、G-CSF等因子。

萌芽型细胞具有独特的信号通路和EMT样表型

KEGG和GSEA分析显示，萌芽型细胞中粘附调控、PI3K-Akt、MAPK、Hippo等通路显著激活，且EMT（上皮-间质转化）相关基因富集。qPCR验证了萌芽型细胞中VIM、TWIST1、SNAI1、MMP1等EMT标志物表达上调。

侵袭性萌芽依赖于FGF轴

通过抑制剂筛选发现，FGFR抑制剂erdafitinib和多靶点抑制剂nintedanib能显著抑制萌芽，而VEGFR或PDGFR单独抑制无效。外源性FGF2可促进萌芽型细胞的侵袭，且萌芽型细胞高表达FGFR1/2及配体FGF1/2/5。Western blot证实FGFR调控ERK磷酸化，但与YAP1活性无直接关联。

靶向FGF/R轴可降低体内SCLC的侵袭行为

在斑马鱼模型中，erdafitinib和nintedanib处理均能显著减少HLHE细胞向尾部的迁移，且erdafitinib还抑制了肿瘤生长，证实FGF/R轴在体内同样关键。

本研究系统阐明了FGF/R信号轴在YAP1主导的SCLC亚型转移中的核心作用。萌芽型细胞表现出显著的EMT特征和侵袭能力，且其依赖FGFR信号而非YAP1直接驱动。临床已应用的FGFR抑制剂（如erdafitinib）和多靶点药物（如nintedanib）在模型中展现出抗转移潜力，为克服SCLC治疗瓶颈提供了新的方向。未来针对FGF/R通路的靶向治疗可能成为抑制SCLC转移、改善患者预后的有效策略。