黄瓜绿斑驳花叶病毒编码的额外小蛋白：亚细胞定位、毒力功能及研究新突破

　　为探究正链单链 RNA（+ssRNA）病毒编码蛋白的奥秘，研究人员以黄瓜绿斑驳花叶病毒（CGMMV）为模型开展研究。他们发现了反义开放阅读框（rORFs），证实其可翻译，突变 rORF1 和 rORF2 会降低病毒毒力，该研究揭示了病毒蛋白质组的新特征，为病毒研究提供新方向。

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　　绝大多数已知病毒属于正链单链 RNA（+ssRNA）类。烟草花叶病毒属（Tobamoviruses）是极具破坏性的植物病毒，威胁全球粮食安全。人们普遍认为，包括烟草花叶病毒属在内的 + ssRNA 病毒仅在其正链（+RNA）上编码蛋白质。在此，研究人员鉴定出烟草花叶病毒属负链上额外的开放阅读框（ORFs），命名为反义开放阅读框（rORFs）。以黄瓜绿斑驳花叶病毒（CGMMV）为模型，通过质谱分析检测到 rORFs 的相应肽段，并借助核糖体分析（ribosome profiling）证实了 rORFs 的翻译。此外，研究表明这些 rORFs 可能从内部核糖体进入位点进行翻译。rORF1 和 rORF2 的突变显著降低了 CGMMV 的毒力，而异位表达 rORF1 和 rORF2 则可挽救突变体的致病性。rORF2 蛋白定位于细胞膜和核仁，rORF1 与过氧化物酶体共定位，且在过氧化物酶体中与病毒的 126-kD 复制蛋白相互作用。研究人员还利用人工智能工具筛选了与 rORF1 相互作用的过氧化物酶体蛋白，发现 PEX3 介导 rORF1 靶向过氧化物酶体。这项研究揭示了烟草花叶病毒属的蛋白质组比之前认为的更大，并表明过氧化物酶体是对病毒感染性至关重要的新毒力靶点。

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