抑制DLK棕榈酰化：一种规避细胞全局抑制副作用的新型神经保护策略

　　本研究针对全球性抑制双亮氨酸拉链激酶(DLK)引发神经轴突细胞骨架破坏的临床困境，通过高通量筛选发现选择性抑制DLK急性轴突棕榈酰化的化合物8和13。该研究揭示TD（营养因子剥夺）诱导的DLK棕榈酰化是其招募至轴突囊泡并启动逆行信号的关键步骤，化合物8/13可特异性阻断该过程而不影响基础DLK功能，在DRG神经元培养和视神经挤压(ONC)模型中均展现神经保护作用，为神经退行性疾病治疗提供了精准靶向新策略。

　　神经退行性疾病治疗领域长期面临一个关键矛盾：双亮氨酸拉链激酶(DLK/MAP3K12)作为促退化信号的核心调控因子，其全局抑制虽能阻断病理进程，却会引发严重的轴突细胞骨架紊乱。这一困境在DLK激酶抑制剂GDC-0134的临床试验中尤为突出——患者出现感觉神经病变伴血浆神经丝蛋白升高，揭示DLK在维持健康轴突结构中的基础作用。Temple大学Gareth M. Thomas团队在《Nature Communications》发表的研究，通过创新性靶向DLK翻译后修饰，为这一难题提供了突破性解决方案。

研究采用高通量成像筛选（28,400种化合物）、微流控培养系统、酰基生物素交换(ABE)棕榈酰化检测等关键技术，结合体内视神经挤压模型。关键发现包括：1）DLK激酶抑制剂GNE-3511直接破坏DRG神经元中神经丝蛋白(NF-200)和微管蛋白(Tuj1)的轴突分布，证实临床不良反应的细胞机制；2）营养剥夺(TD)触发DLK急性棕榈酰化并招募至轴突囊泡，该过程依赖2-溴棕榈酸(2BP)敏感机制；3）从筛选中获得的化合物8和13能选择性阻断TD诱导的DLK棕榈酰化（降幅达70%），却不影响基础状态或GAP-43等其它轴突棕榈酰蛋白；4）在功能上，8/13保护DRG神经元抵抗45小时TD导致的胞体死亡（Calcein-AM检测）和轴突连续性破坏（Watershed算法分析），效果媲美GNE-3511但无细胞骨架副作用；5）机制上二者通过阻断DLK对MKK4的激活抑制JNK-cJun通路，且8对轴突切断和微管破坏(nocodazole)模型均有效，而13显示刺激选择性；6）视网膜内注射实验证实8/13可抑制ONC诱导的Brn3A⁺ RGCs中c-Jun Ser63磷酸化，验证其在体活性。

该研究首次阐明：1）DLK存在时空特异性调控——基础棕榈酰化（可能由ZDHHC17介导）负责其轴突运输，而急性棕榈酰化（可能由未知PAT催化）驱动逆行信号；2）化合物8/13代表全新作用机制，通过时空精准干预实现"功能性选择抑制"；3）为青光眼等视神经病变提供局部给药治疗新思路。值得注意的是，8/13在肝微粒体中稳定性较差（t_1/2<15分钟），提示未来需开发缓释制剂或结构优化。这项研究不仅解决了DLK靶向治疗的核心矛盾，更开创了通过调控蛋白脂质修饰实现信号通路精准干预的新范式。

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