miR-2055p介导 ΔNp63α 与 TAp63α 相互作用抑制肺腺癌细胞迁移：潜在治疗新靶点的探索

　　为探究 miR-205-5p 与 ΔNp63、TAp63^α异构体的潜在关联，Tarbiat Modares University 的研究人员开展相关研究。结果发现存在 ΔNp63^α/miR-205-5p/TAp63^α/DICER 轴调控肺腺癌迁移，该研究为肺癌治疗提供新方向。

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　　肺癌，这个隐匿在全球健康阴影下的 “杀手”，每年都无情地夺走大量生命。2020 年，180 万人因它离世，220 万人被确诊，它在男性中是癌症死亡的首要原因，在女性中也高居第二。肺癌的发生发展是遗传、表观遗传和环境因素共同 “作恶” 的结果，其中 3q 染色体区域的扩增在早期肿瘤发展中扮演着关键角色。TP63 基因正好位于这一区域，它如同一个复杂的 “开关”，存在 ΔNp63 和 TAp63 两种不同的异构体，功能十分复杂。而 miR-205-5p 作为癌症进展中的重要 “参与者”，在不同癌症中时而充当 “帮凶”（促进肿瘤发展），时而扮演 “卫士”（抑制肿瘤发展），其与 TP63 异构体之间的关系更是扑朔迷离，充满未知。

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为了揭开这些谜团，来自伊朗 Tarbiat Modares University 的研究人员踏上了探索之旅。他们希望弄清楚 miR-205-5p 与 ΔNp63^α、TAp63^α异构体之间究竟存在怎样的关联，以及这种关联对肺腺癌细胞的行为有何影响。经过不懈努力，他们发现了一条重要的调控轴 ——ΔNp63^α/miR-205-5p/TAp63^α/DICER，这一发现为理解肺腺癌的发病机制和寻找潜在治疗靶点提供了新的方向，有望为肺癌患者带来新的希望。相关研究成果发表在《Scientific Reports》上。

研究人员主要运用了以下几种关键技术方法：从癌症基因组图谱（TCGA）数据库获取数据进行生物信息学分析；获取伊朗国家肿瘤库的肺癌组织样本并提取 RNA；培养多种细胞系；构建质粒；进行转染、RNA 提取、cDNA 合成及 qRT-PCR 检测基因表达；利用荧光素酶测定评估 miR-205-5p 与 TAp63 5’-UTR 的相互作用；通过 MTT 法检测细胞活力；运用流式细胞术分析细胞凋亡和细胞周期；采用蛋白质免疫印迹法（Western blot）检测蛋白表达；借助伤口愈合实验评估细胞迁移能力。

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下面来详细看看研究结果：

1. miR-205-5p 与 TAp63^α、ΔNp63^α的相关性：通过生物信息学分析，研究人员发现 miR-205-5p 与 TAp63^α、ΔNp63^α异构体在肺腺癌（LUAD）数据集中呈正相关。在 LUAD 和肺鳞癌（LUSC）组织样本中，qRT-PCR 分析进一步证实了 miR-205-5p 与 ΔNp63 的正相关关系，但与 TAp63 的相关性在统计上不显著，这可能与 LUAD 样本中 TP63 异构体表达比例小、样本量小有关。
2. 过表达 ΔNp63^α的影响：在 A549 和 Calu-6 细胞中转染 pcDNA-ΔNp63 后，研究发现过表达 ΔNp63^α在 A549 细胞中可增加 miR-205-5p 和 TAp63^α的表达，还能提高 DICER 表达，降低上皮 - 间质转化（EMT）标记物表达，增加间质 - 上皮转化（MET）标记物表达，从而抑制细胞迁移；而在 Calu-6 细胞中，过表达 ΔNp63^α虽能增加 TAp63 表达，但会降低 miR-205-5p 表达，且促进细胞迁移。同时，过表达 ΔNp63^α对两种细胞的凋亡率和细胞周期无显著影响，但能促进细胞增殖。
3. miR-205-5p 与 TAp63^α的相互作用：荧光素酶报告基因实验表明 TAp63 是 miR-205-5p 的直接靶点，两者相互作用可提高 TAp63 表达。在 A549 和 Calu-6 细胞中过表达 miR-205-5p，发现其可增加 TAp63 mRNA 水平，但在 A549 细胞中 TAp63 蛋白水平升高，在 Calu-6 细胞中则降低。此外，miR-205-5p 还会影响 TAp63 下游基因的表达，且在 A549 细胞中可抑制细胞迁移、促进细胞增殖，在 Calu-6 细胞中对迁移无影响，但能促进细胞增殖。
4. TP63 异构体差异：分析发现 A549 细胞中表达的 TP63 异构体为 TAp63^α，而 Calu-6 细胞中的 TP63 异构体在 5’-UTR 存在差异，缺乏 miR-205-5p 的结合位点，这解释了两种细胞对过表达 ΔNp63^α和 miR-205-5p 的不同反应。

综合研究结论和讨论部分，这项研究意义重大。它揭示了 ΔNp63^α可能在 A549 细胞中作为 miR-205-5p 的转录因子，且部分通过 miR-205-5p 调节 TAp63^α的表达。ΔNp63^α/miR-205-5p/TAp63^α/DICER 轴为肺腺癌迁移的调控提供了新的潜在通路，这不仅加深了我们对肺腺癌发病机制的理解，也为开发基于 microRNA 的治疗方法开辟了新的思路。不过，研究也发现细胞背景会影响 ΔNp63^α对 miR-205-5p 表达的调控，且不同细胞中 TP63 异构体存在差异，这提示在未来的研究和治疗应用中，需要充分考虑肿瘤的异质性，根据不同肿瘤细胞的特点制定个性化的治疗策略，以更好地对抗肺癌这一顽疾。

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