《Cell Biology and Toxicology》：Targeting B4GALT3 in BMSCs-EVs for Therapeutic Control of HCC via NF-κB pathway inhibition
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肝癌（HCC）预后差、治疗手段有限。为探寻新疗法，研究人员开展 “靶向 B4GALT3 在骨髓间充质干细胞衍生的细胞外囊泡（BMSCs-EVs）中对 HCC 的治疗调控” 研究。结果显示，靶向 B4GALT3 可抑制 HCC 进展，为 HCC 治疗提供新方向。
肝癌（Hepatocellular Carcinoma，HCC）是全球常见的恶性肿瘤，发病率和死亡率居高不下。其发病机制复杂，与遗传、环境和生活方式等多种因素相关。大多数 HCC 患者确诊时已处于晚期，传统治疗方法如手术、放疗和化疗对晚期患者疗效有限，且 HCC 复发率高、易产生化疗耐药性，导致患者预后较差。因此，探索新的治疗方法对提高 HCC 患者的生存率和生活质量至关重要。
近年来，肿瘤微环境（Tumor Microenvironment，TME）在肿瘤生长和治疗中的作用受到广泛关注。TME 是一个复杂的生态系统，包含肿瘤细胞、相邻的非肿瘤细胞（如成纤维细胞、免疫细胞和血管细胞）以及细胞外基质。其中，癌症相关成纤维细胞（Cancer-Associated Fibroblasts，CAFs）的广泛激活是 TME 的一个重要特征，CAFs 可分泌多种细胞因子、趋化因子和生长因子，直接或间接支持癌细胞的生长、侵袭和转移，还能调节 TME 的免疫微环境，影响肿瘤的免疫逃逸和耐药性。因此，深入研究 CAFs 在 TME 中的生物学行为，对揭示肿瘤的演变途径和制定新的治疗方案具有重要意义。
骨髓间充质干细胞（Bone Marrow Mesenchymal Stromal Cells，BMSCs）是一种多能细胞，在 HCC 治疗方面展现出一定潜力。BMSCs 的功能主要依赖于其通过旁分泌信号释放的细胞因子、生长因子和细胞外囊泡（Extracellular Vesicles，EVs）。BMSCs-EVs 作为重要的细胞间通讯工具，可运输多种生物分子，影响肿瘤的发展。已有研究表明，BMSCs-EVs 能够抑制 HCC 的进展，然而，BMSCs-EVs 抑制 HCC 的具体机制，特别是其与 B4GALT3/NF-κB 信号通路在激活 CAFs 中的关系尚不明确。
为了深入探究 BMSCs-EVs 在 HCC 进展中的作用及机制，海南总医院的研究人员 Juncheng Guo、Kaiqiong Wang、Qigang Sun、Jun Liu 和 Jinfang Zheng 开展了相关研究。他们发现，BMSCs-EVs 通过运输 B4GALT3 抑制 CAFs 的激活，进而抑制 NF-κB 信号通路，最终抑制 HCC 的肿瘤生长和转移。这一发现为理解 HCC 的发展机制提供了新的视角，也为开发新的 HCC 治疗方法奠定了基础。该研究成果发表在《Cell Biology and Toxicology》杂志上。
研究人员在此次研究中用到了多种关键技术方法。首先是细胞和动物模型的构建，包括分离人 BMSCs 并诱导其分化，培养 CAFs 和 HCC 细胞系，构建 HCC 小鼠模型 。其次是分子生物学技术，如通过转录组测序筛选差异表达基因，利用 RT-qPCR 和 Western blot 检测基因和蛋白表达水平。此外，还运用了细胞生物学实验技术，如 Transwell 实验检测细胞迁移和侵袭能力，流式细胞术检测细胞凋亡 。
研究结果主要包含以下几个方面：
- 筛选调控 HCC 进展的潜在靶点：通过构建 HCC 裸鼠模型并进行转录组测序，研究人员发现 B4GALT3 在 HCC 组中表达下调，且与 CAFs 相关。进一步研究表明，BMSCs-EVs 处理 HCC 小鼠后，肿瘤生长受到抑制，B4GALT3 表达上调。
- BMSCs-EVs 递送 B4GALT3 抑制 CAFs 活性：Dil 染色显示 CAFs 能够摄取 BMSCs-EVs，WB 分析表明 B4GALT3 在 EVs 中富集。实验结果显示，BMSCs-EVs 可将 B4GALT3 递送至 CAFs，抑制 CAFs 的活性，减少胶原蛋白的沉积。
- BMSCs-EVs 通过 B4GALT3 抑制 NF-κB 信号通路激活：双荧光素酶报告基因实验和 WB 实验证实，B4GALT3 与 NF-κB 存在直接相互作用。BMSCs-EVs 通过递送 B4GALT3 抑制 NF-κB 信号通路的激活，从而抑制 CAFs 的活性。
- BMSCs-EVs 抑制 HCC 细胞的迁移、侵袭并诱导凋亡：划痕实验和 Transwell 实验表明，BMSCs-EVs 处理后的 CAFs 与 HCC 细胞共培养，可显著抑制 HCC 细胞的迁移和侵袭能力，促进其凋亡。
- BMSCs-EVs-B4GALT3 抑制 HCC 肿瘤生长和转移：在体内实验中，研究人员发现 BMSCs-EVs 通过抑制 CAFs 的活性，有效抑制了 HCC 肿瘤的生长和转移。
研究结论和讨论部分指出，该研究揭示了 BMSCs-EVs 通过运输 B4GALT3 抑制 CAF 激活和 NF-κB 通路，从而抑制 HCC 肿瘤生长和转移的机制。这一发现具有重要意义，为理解 HCC 的发展机制提供了新的视角，也为开发新的 HCC 治疗方法提供了潜在的策略。然而，该研究也存在一定的局限性，如未直接在体内证明 BMSCs-EVs 特异性作用于 TME 中的 CAFs，以及 BMSCs-EVs 携带 B4GALT3 的抗肿瘤作用是否完全依赖于对 CAF 的调节尚不明确。此外，研究结果主要基于体外和小鼠模型，尚未在人体中得到验证。未来的研究可进一步深入探讨 BMSCs-EVs 在 TME 中的体内机制，开展大规模的动物和临床试验进行验证，并明确 BMSCs-EVs 运输 B4GALT3 至 CAFs 的具体机制。
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