胆管癌（Cholangiocarcinoma，CCA）是一种起源于胆管上皮细胞的恶性肿瘤，近年来其发病率呈逐年上升趋势。它具有高度异质性和侵袭性，死亡率居高不下。目前，手术切除是唯一可能治愈的方法，但术后复发难以避免，多数患者就诊时已失去手术机会，化疗和靶向治疗等辅助手段也只能有限地延长患者生存期。因此，寻找新的治疗靶点和药物对 CCA 的治疗至关重要。
兰州大学第一临床医学院等机构的研究人员开展了相关研究，发现异鼠李素（Isorhamnetin，Iso）可能是治疗 CCA 的有效药物。该研究成果发表在《Discover Oncology》上，为 CCA 的治疗提供了新的思路和方向。
研究人员运用了多种关键技术方法。首先，通过网络药理学从多个数据库筛选 Iso 治疗 CCA 的潜在靶点；接着，利用分子对接验证核心靶点与 Iso 的结合稳定性；随后，进行体外实验，使用人胆管癌细胞系（HCCC-9810 和 RBE），开展 CCK-8、集落形成、划痕愈合、Transwell 侵袭等实验及蛋白质免疫印迹法（Western blotting）、流式细胞术检测相关指标；最后，构建裸鼠皮下肿瘤模型进行体内实验，并通过苏木精 - 伊红染色（HE）和免疫组织化学染色（IHC）分析肿瘤组织。
Iso 和疾病靶点数据库及 “Iso - CCA - Target” 网络图：经数据库搜索，确定 Iso 有 103 个潜在靶点，CCA 相关靶点共 3199 个，二者交集有 50 个潜在靶点，构建出 “Iso - CCA - Target” 网络图。
GO 和 KEGG 通路富集分析揭示 Iso 治疗 CCA 的机制：对 50 个潜在靶点进行 GO 分析，发现其主要参与对化学刺激的反应、细胞死亡等功能。KEGG 富集分析表明，Iso 对 CCA 的治疗作用可能通过 PI3K/AKT 信号通路调节。
核心靶点筛选和分子对接结果：经分析，确定 AKT1 为核心靶点，分子对接显示其与 Iso 结合稳定，结合能为 - 9.9 kcal/mol。
Iso 抑制 CCA 细胞增殖：CCK-8 实验表明 Iso 以时间和剂量依赖方式抑制 CCA 细胞增殖，克隆实验也证实其抑制作用，且 Iso 使细胞周期阻滞于 G1期并促进细胞凋亡。
Iso 抑制 CCA 细胞的侵袭和上皮 - 间质转化（EMT）：划痕愈合实验和 Transwell 侵袭实验显示 Iso 有效抑制 CCA 细胞迁移和侵袭，Western blotting 检测发现 Iso 可调节 EMT 相关蛋白（N-cadherin 和 E-cadherin）表达。
Iso 抑制体内肿瘤生长：构建裸鼠皮下 CCA 肿瘤模型，给药后发现 Iso 可抑制肿瘤生长，对小鼠体重无影响，HE 染色见肿瘤组织坏死，免疫组化分析显示 Iso 下调 Ki67、CD31 和 p-AKT 表达。
研究结论和讨论部分指出，该研究首次揭示 Iso 可通过 PI3K/AKT 通路抑制 CCA 进展，AKT1 可能是 Iso 治疗 CCA 的靶点。虽然目前尚未用抑制剂证实 AKT1 是 Iso 的直接靶点，且研究存在一定局限性，但为后续研究奠定了基础，有望为 CCA 的临床治疗提供新的药物和治疗靶点，推动胆管癌治疗领域的发展。
