miR-125a-5p通过靶向Foxp3调控Treg功能在实验性自身免疫性重症肌无力中的作用机制研究

　　本研究针对重症肌无力(MG)中调节性T细胞(Treg)功能缺陷的机制难题，通过构建实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)模型，首次揭示miR-125a-5p通过靶向抑制Foxp3表达导致Treg细胞数量减少和功能异常，进而促进MG发病。该发现为MG免疫调控机制提供了新靶点，发表于《Immunology Letters》。

　　

重症肌无力(MG)是一种由乙酰胆碱受体抗体(AChR-Ab)介导的自身免疫疾病，其核心矛盾在于免疫系统对神经肌肉接头发动"错误攻击"。尽管已知调节性T细胞(Treg)的数量和功能缺陷是MG的重要特征，但背后的分子机制仍如雾里看花。更耐人寻味的是，胸腺这个"免疫军校"中异常表达的微小RNA(miRNA)可能扮演关键角色——其中miR-125a-5p在胸腺瘤相关MG患者中显著升高，但其在MG发病中的具体作用却存在争议：有研究显示它能上调Foxp3（Treg特异性转录因子），而另一些证据则表明它会抑制Foxp3。这种"分子罗生门"使得广西医科大学的研究团队决定通过EAMG小鼠模型一探究竟。

研究人员采用腺病毒载体调控miR-125a-5p表达，结合肌力评分、低频重复神经刺激等临床评估手段，发现：降低miR-125a-5p可改善肌无力症状，使Foxp3表达提升2.3倍，Treg比例增加1.8倍，抑制性细胞因子IL-10和TGF-β1水平显著升高；而过表达则产生相反效果。这些发现最终发表于《Immunology Letters》，不仅解开了miR-125a-5p在MG中作用机制的争议，更揭示了胸腺miRNA异常通过"miR-125a-5p→Foxp3→Treg功能障碍"通路参与MG发病的新机制。

关键技术方法
研究采用48只C57BL/6雌鼠建立EAMG模型，随机分为6组（包括阴性对照、模型组、miRNA干预组等）。通过RT-qPCR定量miR-125a-5p和Foxp3表达，流式细胞术检测Treg比例，ELISA测定IL-10/TGF-β1水平，CFSE染色分析脾T淋巴细胞增殖能力。

研究结果

1. EAMG小鼠中miR-125a-5p表达变化
   胸腺和脾脏中miR-125a-5p表达较正常组显著上调（p<0.01），腺病毒干预后，miR-125a-5p sponge组表达量降低40%，而过表达组增加2.1倍。

2. miR-125a-5p对MG临床症状的影响
   抑制miR-125a-5p使肌力评分改善62%，AChR-Ab水平下降55%；过表达组则加重症状，证实其直接参与MG病理过程。

3. Foxp3与Treg功能的调控机制
   miR-125a-5p与Foxp3存在靶向结合关系。当miR-125a-5p被抑制时，Foxp3 mRNA和蛋白表达分别增加2.1倍和1.9倍，Treg比例从4.3%升至7.8%，IL-10和TGF-β1分泌量提高2倍以上，脾T细胞增殖能力受抑。

结论与意义
该研究首次在体内证实miR-125a-5p通过负调控Foxp3导致Treg功能障碍，从而促进MG发展。这一发现不仅解释了胸腺miRNA异常如何通过"miRNA-Treg轴"参与MG发病，更提供了潜在治疗靶点——针对miR-125a-5p的干预策略或可成为恢复Treg功能的新途径。值得注意的是，该研究还澄清了领域内关于miR-125a-5p作用的争议，证明其在不同的自身免疫病中可能具有完全相反的调控模式，这种"疾病特异性"的调控特性为精准免疫治疗提供了重要启示。