HNRNPC通过调控m6 A修饰的WDR77 mRNA稳定性及TGF-β/SMAD3通路促进瘢痕疙瘩进展的机制研究

　　瘢痕疙瘩治疗难题亟待突破，华中科技大学同济医学院附属同济医院团队聚焦m6 A修饰机制，发现RNA结合蛋白HNRNPC通过稳定WDR77 mRNA促进TGF-β/SMAD3信号通路的异常激活，驱动瘢痕疙瘩发展。该研究为靶向表观转录调控的临床干预提供新策略，成果发表于《Journal of Investigative Dermatology》。

　　

瘢痕疙瘩作为皮肤纤维化疾病的"顽固分子"，其过度生长的结缔组织常超越原始伤口边界，不仅影响美观更导致功能障碍。尽管已知转化生长因子-β（TGF-β）信号通路异常激活是关键驱动因素，但表观遗传层面的调控机制仍是未解之谜。近年来，RNA m⁶
A（N⁶
-甲基腺苷）修饰作为真核生物最普遍的转录后修饰，在纤维化疾病中逐渐崭露头角。这种动态可逆的化学标记通过影响mRNA代谢，参与细胞命运决定，但其在瘢痕疙瘩中的具体作用模式尚属空白。

华中科技大学同济医学院附属同济医院整形外科团队通过对比15例患者瘢痕疙瘩与正常皮肤组织，首次发现组织内存在m⁶
A超修饰状态，其中异质核核糖核蛋白C（HNRNPC）表达显著升高。研究人员采用短发夹RNA（shRNA）敲低HNRNPC后，瘢痕疙瘩成纤维细胞（KFs）的迁移和增殖能力明显受抑。通过RNA免疫共沉淀-PCR（RIP-PCR）和荧光素酶报告基因实验，鉴定出WD重复结构域77蛋白（WDR77）是HNRNPC的m⁶
A依赖性下游靶标。机制研究表明，HNRNPC通过结合m⁶
A修饰位点增强WDR77 mRNA稳定性，进而上调TGF-β和SMAD3表达。在裸鼠移植模型中，靶向HNRNPC的小干扰RNA（siRNA）处理使瘢痕体积缩小42%，并伴随WDR77/TGF-β信号轴的下调。

关键技术方法
研究采用qRT-PCR和斑点印迹分析m⁶
A修饰水平；通过Transwell和CCK-8实验评估细胞迁移增殖；运用RIP-PCR和双荧光素酶报告系统验证RNA-蛋白相互作用；建立裸鼠异种移植模型进行体内验证。临床样本来自同济医院2022-2024年手术病例。

主要研究结果

1. Hyper-m⁶
   A-modifying status and up-regulated HNRNPC expression
   组织学分析显示瘢痕疙瘩中甲基转移酶METTL14表达增加2.3倍，而去甲基化酶FTO降低60%，伴随整体m⁶
   A水平升高。

2. HNRNPC-WDR77调控轴
   RNA结合实验证实HNRNPC直接结合WDR77 mRNA的3'UTR区m⁶
   A位点，使其半衰期延长至对照组的1.8倍。

3. 体内外功能验证
   siRNA干预使KFs胶原分泌量减少55%，动物实验中治疗组瘢痕重量较对照组降低310±25mg。

结论与意义
该研究首次阐明HNRNPC通过m⁶
A-WDR77-TGF-β/SMAD3轴驱动瘢痕疙瘩发展的分子机制，突破传统聚焦蛋白质编码基因的研究范式。发现m⁶
A阅读蛋白可作为治疗靶点，为开发RNA表观遗传修饰剂提供理论依据。研究团队指出，针对HNRNPC的寡核苷酸药物可能成为复发型瘢痕疙瘩的精准治疗选择，目前正推进临床前安全性评价。