免疫原性双药纳米药物与聚合物囊泡CpG纳米佐剂原位生成抗白血病疫苗的研究

　　急性髓系白血病(AML)治疗面临白血病细胞难以彻底清除的难题。为解决传统疫苗免疫原性不足和制备繁琐的问题，研究人员开发了基于免疫原性双药纳米药物(nanoVi/Vo)和聚合物囊泡CpG佐剂(nanoCpG)的原位疫苗策略。该方案通过诱导免疫原性细胞死亡(ICD)产生多样化肿瘤抗原，协同纳米佐剂促进树突状细胞(DC)成熟和T细胞活化，在WEHI-3-Luc AML原位模型中显著抑制白血病进展，使57%小鼠获得长期生存。这项研究为AML免疫治疗提供了创新性解决方案。

　　

急性髓系白血病（AML）是造血系统最具侵袭性的恶性肿瘤之一，患者5年生存率不足28%。尽管分子靶向药物与化疗联合应用取得进展，但白血病细胞清除不彻底导致的复发仍是治疗瓶颈。传统癌症疫苗虽在实体瘤中展现潜力，却因AML肿瘤抗原免疫原性弱、个性化制备复杂而收效甚微。这促使科学家将目光转向原位疫苗策略——利用肿瘤自身抗原激发免疫应答，但如何高效诱导免疫原性细胞死亡(ICD)并协同激活免疫系统成为关键挑战。

苏州大学的研究团队在《Journal of Colloid and Interface Science》发表创新成果，开发了基于免疫原性双药纳米系统(nanoVi/Vo)和聚合物囊泡CpG佐剂(nanoCpG)的原位疫苗平台。该研究通过聚合物囊泡共递送长春新碱(Vi)和PLK1抑制剂沃拉塞替(Vo)，同步采用纳米化TLR9激动剂CpG，构建了兼具化疗协同、ICD诱导和免疫激活三重功能的治疗体系。关键技术包括：双药纳米颗粒的比率控制制备、聚合物囊泡佐剂的稳定性优化、以及通过流式细胞术和活体成像系统评估免疫细胞活化与白血病负荷。

材料与方法
研究选用WEHI-3-Luc AML细胞系建立小鼠原位模型，通过自组装法制备粒径约100 nm的nanoVi/Vo，包封率达85%以上。采用CCK-8法验证双药协同指数(CI<0.3)，通过检测HMGB1释放和钙网蛋白(CRT)暴露评估ICD效应。纳米CpG采用聚(乙二醇)-_b
-聚(赖氨酸)两亲性嵌段共聚物包裹，显著提升血清稳定性。

体外抗AML活性
nanoVi/Vo展现出剂量依赖性细胞毒性，48小时IC₅₀
为游离药物的1/3。共聚焦显微镜观察到纳米颗粒有效内化至溶酶体，同步释放Vi和Vo。关键发现是双药系统诱导了典型的ICD标志物：胞外ATP分泌增加8倍，CRT膜易位率达62%，显著高于单药组(P<0.01)。

体内免疫激活
在接种WEHI-3-Luc细胞的小鼠中，nanoVi/Vo+nanoCpG组骨髓DC成熟率(CD80⁺
CD86⁺
)达71%，较对照组提高4倍。流式检测显示CD8⁺
T细胞浸润增加5.2倍，IFN-γ分泌提升6倍。活体成像显示该组合显著抑制白血病细胞向脾脏和肝脏转移(P<0.001)。

生存获益分析
联合治疗组中位生存期延长至75天，57%小鼠获得长期生存，而对照组均在35天内死亡。病理分析证实治疗组骨髓 blast细胞减少90%，且主要器官未见白血病浸润。

该研究创新性地将化疗协同、ICD诱导和先天免疫激活三大功能整合于纳米平台。nanoVi/Vo通过比率控制递送克服了传统化疗药物耐药性问题，而纳米化CpG解决了游离佐剂易降解的缺陷。特别值得注意的是，该策略无需预先鉴定肿瘤抗原，通过原位产生多样化抗原库，为AML个性化免疫治疗提供了普适性方案。研究证实PLK1抑制剂不仅能克服化疗耐药，其ICD诱导能力的发现拓展了靶向药物的应用维度。这项成果为血液肿瘤的纳米免疫治疗提供了概念验证和转化基础。