绵羊源细粒棘球绦虫AgB2基因多态性表征及其对血清学反应的影响

　　本研究针对细粒棘球绦虫（Echinococcus granulosus s.l.）抗原B亚基2（AgB2）基因多态性影响诊断敏感性的问题，通过分析土耳其Elazig和Bingol地区绵羊分离株的遗传变异与血清学反应关联性。研究发现AgB2基因存在663 bp高变区域，鉴定出10种新单倍型（AgB2.Hap_01-10），Western Blot检测显示80.4%灵敏度与100%特异性，为优化CE诊断及疫苗设计提供重要依据。

　　

囊型包虫病（Cystic Echinococcosis, CE）是全球范围内危害严重的人畜共患寄生虫病，尤其在畜牧业发达地区，不仅威胁人类健康，还造成巨大经济损失。细粒棘球绦虫（Echinococcus granulosus sensu lato）作为主要病原体，其生命周期涉及犬科动物终宿主和羊、牛等中间宿主。当人类误食虫卵后，幼虫可在肝脏、肺部形成包裹性囊肿，引发致命并发症。尽管已有诊断方法，但抗原变异导致的检测敏感性差异始终是临床难题。

抗原B（Antigen B, AgB）作为幼虫阶段分泌的关键免疫原性蛋白，由多基因家族编码，包含AgB1-AgB5五个亚基。其中AgB2因诊断潜力突出备受关注，但其基因多态性如何影响宿主抗体反应尚不明确。这一问题直接关系到诊断试剂优化和疫苗靶点筛选。

为解决这一科学问题，来自土耳其科学和技术研究委员会（TUBITAK）支持的研究团队，对土耳其东部Elazig和Bingol两个CE高发区的绵羊分离株展开深入研究。通过采集41份绵羊肝/肺包囊胚膜及对应血清样本，采用PCR扩增结合DNA测序分析AgB2基因变异特征，并利用富含AgB的囊液抗原进行Western Blot（WB）血清学评估。

关键技术方法包括：1）从屠宰场绵羊脏器采集包囊胚膜及配对血清样本；2）AgB2基因区PCR扩增与Sanger测序；3）基于序列比对的单倍型分型；4）部分纯化囊液抗原的WB检测。

主要研究结果

Collection of hydatid cyst and blood serum samples
研究团队在土耳其东部CE流行区系统采集样本，确保样本代表性与地域特异性，为后续遗传分析和血清学关联研究奠定基础。

PCR and sequence analysis
成功扩增出739 bp AgB2基因片段，经末端修剪后获得663 bp有效序列。33个分离株测序揭示该区域存在显著多态性，发现10种独特单倍型（AgB2.Hap_01-10），GenBank登录号为PQ723123-PQ723155。

Alignment and phylogeny
序列比对显示AgB2基因存在高频点突变与插入缺失变异，系统发育分析证实土耳其分离株具有地域特异性遗传特征。

Discussion
多态性可能导致AgB2抗原表位构象改变，解释WB检测中80.4%灵敏度与100%特异性的差异。某些单倍型可能通过免疫逃逸机制影响抗体识别，这与Virginio等提出的抗原变异理论相符。

Conclusion
该研究首次系统揭示土耳其绵羊源细粒棘球绦虫AgB2基因的复杂多态性图谱，证实遗传变异与血清学反应差异存在关联。发现的新单倍型为开发地域适应性诊断标记提供分子基础，同时为理解寄生虫免疫逃避机制提供新视角。

这项发表于《Journal of Immunological Methods》的研究具有双重意义：在应用层面，指导CE诊断试剂的区域化改良；在理论层面，深化对AgB家族基因进化与功能分化的认知。未来需扩大样本量并开展重组蛋白免疫原性验证，以加速转化应用。研究团队特别强调，在CE防控中需考虑寄生虫种群遗传差异，这对"一带一路"沿线流行区的精准防控具有启示价值。