假结核耶尔森氏菌硫氧还蛋白系统相关基因参与抗氧化胁迫的机制

　　 摘要: 【背景】硫氧还蛋白系统是细菌重要的氧化还原状态维持系统

　　 摘要:

【背景】硫氧还蛋白系统是细菌重要的氧化还原状态维持系统。假结核耶尔森氏菌(Yersinia pseudotuberculosis) YPⅢ是肠道常见的机会致病菌，在YPⅢ中进行过氧化氢胁迫下的转录组测序，结果发现硫氧还蛋白系统的相关基因有所上调，可能参与细菌氧化胁迫的应答。【目的】研究假结核耶尔森氏菌中硫氧还蛋白系统应答氧化胁迫的方式。【方法】利用同源重组方法构建硫氧还蛋白系统缺失突变株(ΔtrxA、ΔtrxC和ΔtrxR)，研究假结核耶尔森氏菌在过氧化氢胁迫下的生长，测定过氧化氢对细菌的最低抑菌浓度、过氧化氢清除能力，以及过氧化氢处理下的存活率等。同时，通过lacZ报告基因系统对硫氧还蛋白系统的表达调控进行探究。【结果】构建硫氧还蛋白系统缺失突变株，发现缺失trxA后显著影响了假结核耶尔森氏菌的抗氧化胁迫能力，因此TrxA是硫氧还蛋白系统中应答氧化胁迫的主要蛋白；在ΔtrxA中过氧化氢酶的表达上调，但不足以保护细菌及时修复受损的生物大分子；启动子活性测定及实时荧光定量PCR (real time quantitative PCR, RT-qPCR)实验结果表明trxC和trxR的表达可能受到细菌氧化胁迫转录调控因子OxyR的影响。【结论】硫氧还蛋白系统作为细菌内部还原环境的维持系统，在OxyR的调控下参与氧化胁迫应答，并发挥了重要的作用。