摘要: 2',4'-二甲氧基查尔酮(DMC) 是卡瓦胡椒素B的结构修饰物, 本课题以胃癌细胞MGC-803和HGC-27为研究对象, 探讨DMC对胃癌细胞的体内外抗肿瘤作用及机制。采用CCK-8法、EdU染色法和Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测胃癌细胞活力、增殖率和凋亡率, 发现DMC抑制胃癌细胞活力和增殖, 促进胃癌细胞凋亡; 构建裸鼠胃癌细胞皮下移植瘤模型观察DMC对胃癌移植瘤生长的影响, 发现DMC抑制裸鼠胃癌皮下移植瘤的生长, 动物实验获得上海中医药大学动物伦理委员会的批准, 伦理编号为PZSHUTCM2310110002。转录组学研究DMC对MGC-803细胞RNA表达的影响, 发现生物功能富集于糖酵解; 采用2-NBDG探针标记及流式细胞术和乳酸测试盒检测胃癌细胞葡萄糖摄取能力和乳酸生成与外排能力, 发现DMC抑制胃癌细胞的葡萄糖摄取能力和乳酸生成与外排; 通过蛋白印迹实验检测胃癌细胞增殖、凋亡及糖酵解相关蛋白的表达, 发现DMC能上调胃癌细胞促凋亡蛋白cleaved caspase-9、cleaved caspase-3、cleaved PARP的表达, 下调胃癌细胞增殖标志物Ki-67的蛋白表达, 并抑制胃癌细胞糖酵解相关蛋白c-Myc、LDHA、GLUT3、PDHK1和MCT1的表达; 通过Seahorse能量代谢分析仪检测实时糖酵解速率, 发现DMC能下调胃癌细胞基础糖酵解速率和代偿糖酵解; 通过c-Myc过表达稳转株MGC-803细胞的翻转实验明确DMC通过抑制c-Myc介导的葡萄糖摄取和糖酵解发挥胃癌抑制作用。综上所述, DMC可能通过调控胃癌细胞c-Myc及其靶基因糖酵解相关蛋白的表达, 抑制胃癌细胞c-Myc介导的葡萄糖摄取功能和糖酵解, 从而抑制胃癌细胞增殖, 促进胃癌细胞凋亡, 最终在体内外抑制胃癌的生长。
