载葛根素血浆外泌体的制备及其对体外血脑屏障模型通透性的影响

　　 摘要: 通过超速离心法提取大鼠血浆外泌体(plasma exosomes, Pla-Exos), 150 000 ×g, 离心2.5 h

　　

摘要: 通过超速离心法提取大鼠血浆外泌体(plasma exosomes, Pla-Exos), 150 000 ×g, 离心2.5 h。比较超速离心法、超滤法、磁珠捕获法对Pla-Exos的纯化效果。使用超声共孵育的方法制备载葛根素外泌体(plasma exosomes carrying puerarin, Pue-Exos), 以包封率为指标采用响应面法筛选最优处方并测定表征、评估稳定性和体外释放情况。纯化的Pla-Exos和Pue-Exos的粒径均在30~150 nm内; 蛋白质免疫印迹法结果显示, 纯化的Pla-Exos和Pue-Exos均含有标志蛋白TSG101、CD63、CD81。透射电镜观察纯化后的Pla-Exos和Pue-Exos均具有良好的双层膜囊泡结构。Pue-Exos制备的最优处方为孵育1 h, 超声功率39 W, 载药比10∶1。制备得到的Pue-Exos有较好的稳定性和缓释作用, 提高了葛根素体外血脑屏障的透过效率(P < 0.01)。本研究经河北北方学院实验动物伦理审查委员会批准, 伦理审批号：HBNV202307012103。