荷花NnCYP707A1的克隆及功能分析

　　 摘要： 目的 利用荷花具有较强的重金属吸附能力这一特性，为其参与铜污染防治的植物修复提供优质的基因资源

　　

摘要：

目的 利用荷花具有较强的重金属吸附能力这一特性，为其参与铜污染防治的植物修复提供优质的基因资源。 方法 基于课题组前期对荷花铜胁迫转录组数据的分析，筛选并克隆荷花铜胁迫的关键基因NnCYP707A1，利用在线网站及软件分析其序列特征和进化关系，通过农杆菌注射烟草观察亚细胞定位情况，通过转化酿酒酵母、瞬时转化荷花，分析其对铜胁迫的响应。 结果 NnCYP707A1的ORF全长1 065 bp，编码354个氨基酸，含有细胞色素P450家族的保守结构域PFGXGXHXCPG；NnCYP707A1蛋白为稳定的亲水性蛋白，分子量为40.592 kD，等电点数为8.68；其属于CYP707A亚族，与毛果杨的PtCYP707A1遗传距离较近；亚细胞定位结果表明，该蛋白定位于细胞质；过表达NnCYP707A1增强了酿酒酵母对铜胁迫的敏感性；过表达荷花植株（OE-CYP707A1）的相关生理指标未得到改善，而沉默荷花植株（cyp707a1）可以缓解铜胁迫对其的抑制作用。 结论 过表达NnCYP707A1对铜胁迫耐受性减弱，降低了荷花的抗铜性。