VvAGAMOUS通过VvCRABS CLAW调控葡萄心皮发育

　　 摘要： 目的 分析葡萄心皮发育相关基因VvAGAMOUS（VvAG）和VvCRABS CLAW（VvCRC）的表达特性，旨在探究VvAG通过VvCRC基因调控葡萄心皮发育的分子机制，为解析葡萄果实形成分子机制提供理论依据

　　

摘要：

目的 分析葡萄心皮发育相关基因VvAGAMOUS（VvAG）和VvCRABS CLAW（VvCRC）的表达特性，旨在探究VvAG通过VvCRC基因调控葡萄心皮发育的分子机制，为解析葡萄果实形成分子机制提供理论依据。 方法 以‘玫瑰香’葡萄不同长度的花序为材料，用石蜡切片法观察心皮的发育过程，并通过RT-qPCR检测VvAG和VvCRC在不同发育时期的表达情况。克隆VvAG和VvCRC基因，并进行同源性序列比对和系统进化关系等生物信息学分析。通过瞬时注射烟草叶片对2个基因编码的蛋白进行亚细胞定位。利用酵母单杂交试验和双荧光素酶试验验证VvAG与VvCRC之间的关系。 结果 解剖学观察显示，‘玫瑰香’葡萄花序长度为1?2 cm时，雄蕊原基基本发育完全，心皮原基准备形成；当花序发育至2?3 cm和3?4 cm两个时期，心皮继续发育，胚珠原基开始形成。RT-qPCR结果表明，在花序长度为1?2 cm时，VvAG和VvCRC表达量较低，而在花序长度为2?3 cm和3?4 cm两个时期，VvCRC基因的表达量则随着VvAG基因表达量的增加而迅速增加。系统发育分析结果表明，VvAG与AtAG，VvCRC与MdCRC聚为一小分支，亲缘关系较近。亚细胞定位结果表明，VvAG和VvCRC蛋白均定位于细胞核中。酵母单杂交和双荧光素酶试验结果显示，VvAG可以直接与VvCRC启动子结合并激活其转录活性。 结论 VvAG转录因子可能通过激活VvCRC基因的表达，进一步调控心皮的发育，从而影响葡萄子房的发育。