白花草木樨毛状根高效基因组编辑体系的建立

　　摘要： 白花草木樨(Melilotus albus)具有粗蛋白含量高、耐逆性强等特点, 是优良饲草、轮作和水土保持作物

　　摘要： 白花草木樨(Melilotus albus)具有粗蛋白含量高、耐逆性强等特点, 是优良饲草、轮作和水土保持作物。然而, 白花草木樨稳定遗传转化体系以及基因编辑体系尚未建立, 限制了其基因功能分析及新种质的创制。本研究基于35S::MtLAP1表达盒可诱导再生体花青苷累积进而裸眼“显红色”的原理, 建立了白花草木樨下胚轴毛状根快速诱导和筛选体系, 毛状根诱导率达62%, 阳性率达30.8%。此外, 利用携带有35S::MtLAP1表达盒且由拟南芥AtUbiquitin-10强启动子启动Cas9和sgRNA模块协同表达的基因编辑载体, 能通过上述毛状根体系实现白花草木樨MaPDS (Phytoene Desaturase)的高效编辑, 编辑效率达42.5%。本研究为白花草木樨基因功能研究及高品质种质新资源培育奠定了基础。