万寿菊花冠高效瞬时转化体系的建立及TeCYC2c基因启动子活性分析

　　摘要： 该研究旨在建立万寿菊(Tagetes erecta)花冠高效瞬时转化体系并探究调控花器官对称性形成关键基因TeCYC2c启动子活性

　　摘要： 该研究旨在建立万寿菊(Tagetes erecta)花冠高效瞬时转化体系并探究调控花器官对称性形成关键基因TeCYC2c启动子活性。以CaMV35S启动子与GUS基因的融合表达载体瞬时转化万寿菊花冠, 探究菌株类型、菌液浓度、侵染时间和共培养时间对GUS基因瞬时转化效率的影响, 结果显示GV3101菌株的侵染效率最高; 菌液浓度OD₆₀₀为1.0转化效率最高; 侵染时间对瞬转效率无显著影响; 共培养1天为最佳培养时间。基于建立的万寿菊花冠瞬时转化体系, 对TeCYC2c基因启动子活性进行探究。克隆了TeCYC2c基因上游1 735 bp序列, 并通过PlantCARE预测的元件分布位置及数量构建了4个启动子缺失表达载体, 以GUS基因为报告基因瞬时转化万寿菊花冠进行不同长度启动子活性研究。结果显示, 启动子核心区域位于ATG上游–650– –1 bp, 推测该区域内的光响应元件正调控下游基因表达, 而pTeCYC2c (–1735)和pTeCYC2c (–140 6)所特有的植物激素响应元件和逆境响应元件可能具有抑制启动子驱动下游基因表达的功能。通过结合万寿菊花冠瞬时转化体系的建立和TeCYC2c启动子的活性分析, 为进一步快速解析花发育相关基因的功能奠定了技术基础。