虹鳟鱼CYLD通过RIP1去泛素化抑制LPS诱导的炎症反应及其免疫调控机制

　　本研究针对鱼类TLR信号通路中CYLD的调控机制这一未解之谜，通过功能增益与缺失实验证实虹鳟鱼OmCYLD通过其USP结构域特异性去泛素化RIP1，抑制MAPK/NF-κB通路激活及促炎因子产生，揭示了CYLD在硬骨鱼中保守的免疫负调控作用，为水产养殖抗病育种提供新靶点。

　　

在水产养殖业面临细菌性疾病威胁的背景下，虹鳟鱼作为重要经济鱼种，其免疫调控机制研究具有特殊价值。与哺乳动物相比，硬骨鱼Toll样受体(TLR)信号通路的负调控机制尚不明确，尤其是去泛素化酶CYLD如何调控关键接头蛋白RIP1的泛素化状态仍属空白。这一问题直接关系到鱼类炎症反应的精确调控，过度激活会导致免疫病理损伤，而抑制不足则影响病原清除效率。

韩国国家研究基金会支持的研究团队通过分子生物学和免疫学方法，利用虹鳟鱼肝细胞系RTH-149，结合基因过表达、RNA干扰和位点突变技术，系统研究了OmCYLD在脂多糖(LPS)刺激下的表达规律及其对RIP1泛素化的调控作用。

OmCYLD表达在LPS刺激的RTH-149细胞中
LPS处理诱导OmCYLD表达呈剂量和时间依赖性，峰值出现在刺激后6小时，提示其可能参与TLR4通路的反馈调节。

OmCYLD对MAPKs和NF-κB活化的调控
功能实验显示，OmCYLD过表达显著抑制LPS诱导的p38、JNK和ERK磷酸化，以及NF-κB报告基因活性，同时降低IL-1β、TNF-α等促炎因子mRNA水平；而敲低OmCYLD则产生相反效应，证实其负调控作用。

OmCYLD与RIP1的相互作用机制
免疫共沉淀揭示OmCYLD通过第三CAP-Gly结构域和USP(泛素特异性蛋白酶)域与RIP1结合，这种结合不依赖其酶活性。LPS刺激显著增强RIP1的多聚泛素化修饰，而OmCYLD过表达能逆转此现象。USP结构域突变体丧失去泛素化能力，证实该域对RIP1泛素化状态的调控至关重要。

这项发表于《Fish》的研究首次阐明：虹鳟鱼CYLD通过特异性去泛素化RIP1，负调控TLR4介导的MAPK/NF-κB信号轴，其分子机制与哺乳动物具有保守性。该发现不仅拓展了对硬骨鱼免疫调控网络的认知，更为开发靶向CYLD-RIP1轴的水产抗病策略提供了理论依据。值得注意的是，OmCYLD与RIP1的相互作用模式暗示可能存在非酶活性的调控方式，这为DUB功能研究开辟了新视角。作者Ju Hye Jang等强调，深入解析CYLD在不同鱼类中的调控差异，将有助于制定物种特异性的免疫干预方案。